[發(fā)明專利]凍干PCR預(yù)混液的試劑

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910867009.5
• 申請日: 2019-09-12
• 公開（公告）號: CN112481365A
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周猛沖;章瑞程;林鈺瓊;黃杏帆;范國來
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東菲鵬生物有限公司
• 主分類號: C12Q1/6876
• 分類號: C12Q1/6876
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 徐樂

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體而言，提供了一種凍干PCR預(yù)混液的試劑。本發(fā)明通過采用在PCR預(yù)混液中添加穩(wěn)定處方實現(xiàn)PCR預(yù)混液的凍干，穩(wěn)定處方組分簡單，凍干成品成型良好，穩(wěn)定期長，且穩(wěn)定處方不影響PCR擴增效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種凍干PCR預(yù)混液的試劑。

背景技術(shù)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于擴增特定的基因片段，目前該技術(shù)已在全世界范圍內(nèi)廣泛應(yīng)用，因其具有較高的靈敏度，優(yōu)良的特異性，并且具有操作簡便，快捷等優(yōu)點，在生物和醫(yī)學(xué)研究中起到了舉足輕重的作用。

目前市場流通的用于基因檢測的PCR試劑大部分為液體試劑，且擴增所需的各個組分通常需要分幾管分裝，常溫儲存并不穩(wěn)定，需要進(jìn)行超低溫保存和運輸，這就給儲存和運輸帶來很大不便，同時試劑的效期短，在檢測操作中增加了環(huán)境中氣溶膠對擴增體系的污染風(fēng)險。對此，將液體試劑混合凍干制備成凍干的PCR預(yù)混液進(jìn)行保存為目前的一種改進(jìn)方法。

市場上凍干的PCR預(yù)混液按照是否含有擴增引物分為兩種，一種是凍干PCR擴增預(yù)混液，另外一種是凍干PCR酶預(yù)混液，其區(qū)別在于，前者為設(shè)計好的針對目的基因的全混檢測試劑，直接加水復(fù)溶后，添加待檢樣本即可檢測；而后者僅含有PCR擴增所需的酶，有的還含有擴增所需的底物，其可根據(jù)需求應(yīng)用于各類目的基因的檢測。目前凍干PCR預(yù)混液的凍干難點之一是穩(wěn)定處方，穩(wěn)定處方不僅需要保證凍干PCR預(yù)混液成型，保存期理想，更重要的是引入的處方不干擾、不破壞預(yù)混液各試劑的PCR擴增效率。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種用于凍干PCR預(yù)混液的穩(wěn)定處方，以保證凍干PCR預(yù)混液成型，保存期理想，更重要的是引入的處方不干擾、不破壞預(yù)混液各試劑的PCR擴增效率。

本發(fā)明的第二目的在于提供一種凍干PCR預(yù)混液的方法。

本發(fā)明的第三目的在于提供凍干的PCR預(yù)混液，以緩解現(xiàn)有技術(shù)中凍干的PCR預(yù)混液相較于凍干前擴增效率差距大等問題。

為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

一種用于凍干PCR預(yù)混液的穩(wěn)定處方，所述穩(wěn)定處方包括如下a)-c)任一種組成：

a)氫化麥芽糖；

b)氫化麥芽糖和蜜里三糖；

c)氫化麥芽糖和蜜里三糖，以及，海藻糖、乳糖或蔗糖中的至少一種。

進(jìn)一步地，所述氫化麥芽糖的使用終濃度為3-10w/v％，優(yōu)選為5-10w/v％，進(jìn)一步優(yōu)選為6-10w/v％。

進(jìn)一步地，所述蜜里三糖的使用終濃度為2-10w/v％，優(yōu)選為6-10w/v％，進(jìn)一步優(yōu)選為7-10w/v％。

進(jìn)一步地，所述海藻糖的使用終濃度為3-12w/v％，優(yōu)選為6-12w/v％，進(jìn)一步優(yōu)選為7-11w/v％。

進(jìn)一步地，所述乳糖的使用終濃度為0.3-3w/v％，優(yōu)選為0.3-1w/v％，進(jìn)一步優(yōu)選為0.4-0.9w/v％。

進(jìn)一步地，所述蔗糖的使用終濃度為2-9w/v％，優(yōu)選為6-9w/v％，進(jìn)一步優(yōu)選為7-8w/v％。

進(jìn)一步地，所述PCR預(yù)混液包括PCR擴增預(yù)混液或PCR酶預(yù)混液。

一種凍干PCR預(yù)混液的方法，在PCR預(yù)混液中加入穩(wěn)定處方，經(jīng)凍干得到凍干的PCR預(yù)混液。

上述方法制備得到的凍干的PCR預(yù)混液。

一種包括上述凍干的PCR預(yù)混液的試劑盒。