[發明專利]一種可以改善全基因組甲基化測序偏向性的建庫方法有效
| 申請號： | 201910851085.7 | 申請日： | 2019-09-10 |
| 公開（公告）號： | CN112553298B | 公開（公告）日： | 2023-06-23 |
| 發明（設計）人： | 羅慧娟;楊琴;羅甜;于源;吳逵;李旺勝;辜倫達;李南南;陳小芳 | 申請（專利權）人： | 深圳華大生命科學研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/6806 | 分類號： | C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 何葉喧 |
| 地址： | 518083 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 可以 改善 基因組 甲基化 偏向 方法 | ||
1.一種制備甲基化測序文庫的方法，依次包括如下步驟：
(1)在同一體系內進行雙鏈DNA片段的末端修復和加A；在末端修復和加A的反應體系中，加入的脫氧核糖核苷酸為dATP、dTTP和dGTP，加入的酶包括DNA?PolymeraseI；
(2)連接甲基化修飾接頭；
(3)進行亞硫酸鹽處理。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法還包括如下步驟：
(4)PCR擴增。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于：所述方法還包括如下步驟：
(5)單鏈環化。
4.一種制備甲基化測序文庫的方法，包括末端修復和加A的步驟，其特征在于：
在同一體系內進行雙鏈DNA片段的末端修復和加A；在末端修復和加A的反應體系中，加入的脫氧核糖核苷酸為dATP、dTTP和dGTP，加入的酶包括DNA?Polymerase?I。
5.一種制備甲基化測序文庫中進行末端修復和加A的方法，其特征在于：
在同一體系內進行雙鏈DNA片段的末端修復和加A；在末端修復和加A的反應體系中，加入的脫氧核糖核苷酸為dATP、dTTP和dGTP，加入的酶包括DNA?Polymerase?I。
6.一種制備甲基化測序文庫的方法，包括末端修復的步驟，其特征在于：
在末端修復的體系中，加入的脫氧核糖核苷酸為dATP、dTTP和dGTP，加入的酶包括DNAPolymerase?I。
7.一種制備甲基化測序文庫中進行末端修復的方法，其特征在于：
在末端修復的體系中，加入的脫氧核糖核苷酸為dATP、dTTP和dGTP，加入的酶包括DNAPolymerase?I。
8.一種制備甲基化測序文庫的試劑盒，包括組件1、組件2和組件3；
所述組件1用于末端修復和加A；所述組件1包括dNTP和DNA?PolymeraseI；所述dNTP由dATP、dTTP和dGTP組成；
所述組件2用于連接甲基化修飾接頭；
所述組件3用于進行亞硫酸鹽處理。
9.一種制備甲基化測序文庫中進行末端修復和加A的試劑盒，包括dNTP和DNAPolymerase?I；所述dNTP由dATP、dTTP和dGTP組成。
10.一種制備甲基化測序文庫中進行末端修復的試劑盒，包括dNTP和DNA?PolymeraseI；所述dNTP由dATP、dTTP和dGTP組成。
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