[發明專利]分泌人鐵蛋白輕鏈單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其應用

有效

• 申請號: 201910738807.8
• 申請日: 2019-08-12
• 公開（公告）號: CN110468108B
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 孫興寶;戶元林;顧麗霞;劉奇奇
• 申請（專利權）人: 杭州伊佰新生物技術有限公司
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/18;G01N33/577;G01N33/68
• 代理公司: 杭州宇信知識產權代理事務所(普通合伙) 33231
• 代理人: 李學紅

本發明公開了一株雜交瘤細胞株3F6，其保藏編號是CCTCC NO:C2019173，其能夠分泌特異性識別人鐵蛋白輕鏈的單克隆抗體FTL?McAb1，同時公開了該單克隆抗體FTL?McAb1在檢測人鐵蛋白上的用途，以及由該單克隆抗體FTL?McAb1制備的人血清鐵蛋白免疫檢測試劑盒。

技術領域

本發明涉及免疫檢測領域，具體地說是涉及一種能夠分泌人鐵蛋白輕鏈單克隆抗體的雜交瘤細胞株，由該雜交瘤細胞株分泌的單克隆抗體，以及在檢測人血清鐵蛋白中的用途，以及由該單克隆抗體制備的人鐵蛋白檢測試劑盒。

背景技術

缺鐵性貧血(Iron deficiency anemia，IDA)是由于各種不同的原因導致體內儲存鐵缺乏，影響細胞血紅素的生成而導致的貧血，該類貧血紅細胞形態變小，中央淡染區擴大，屬于小細胞低色素性貧。貧血的患者中大約50％都是由于缺鐵導致的缺鐵性貧血。缺鐵性貧血的實驗室檢查主要有兩個目的：一是確定患者所處的缺鐵階段，二是在臨床上區分缺鐵性貧血(IDA)和慢性病貧血(ACD)。

研究表明，血清鐵蛋白的含量與機體儲存鐵是成一定比例的，lug/L的血清鐵蛋白對應于8-10mg或每公斤體重120ug儲存鐵。大量的研究均證實了血清鐵蛋白相較于其他鐵相關檢測用于診斷缺鐵性貧血診斷的優越性，從多份的研究中得出血清鐵蛋白作為診斷缺鐵性貧血的ROC曲線的AUC平均值為0.95(95％的置信區間)，而鋅原卟啉(zincprotoporphyrin，ZPP)為0.77、平均紅細胞體積(MCV)為0.74、轉鐵蛋白飽和度(transferrin saturation)為0.74。隨著血清鐵蛋白在臨床診斷上越來越廣泛的應用和標準化的建立，血清鐵蛋白已逐漸取代骨髓鐵染色作為評價機體儲存鐵狀態的新金標準。不僅如此，血清鐵蛋白在鐵缺乏期(iron depletion，ID)就有很明顯的變化，是機體內儲存鐵缺乏靈敏的標志物。臨床上血清鐵蛋白的檢測能甄別出缺鐵的早期階段，從而能盡早地采取調整膳食結構或補充鐵劑等措施，預防缺鐵性貧血的發生。人血清鐵蛋白水平降低，一般代表缺鐵性貧血，水平升高原因是惡性腫瘤，炎癥，肝病等。因此，檢測血清鐵蛋白含量，對缺鐵性貧血的、惡性腫瘤、炎癥、肝病的監測有重要意義。

人血清鐵蛋白主要由L亞基組成，只含有少量的H亞基，鐵原子的含量也很少。人血清鐵蛋白在血液中均以24聚體的納米顆粒形式存在，未發現未組裝的亞基。

免疫學檢測由于其靈敏度高，速度快的優勢，已經在檢測人血清鐵蛋白上得到越來越廣泛的應用。血清鐵蛋白免疫學檢測試劑盒質量的最主要制約因素就是生物活性原材料的質量。從方法學上來說，血清鐵蛋白檢測試劑盒大多采用雙抗體夾心法，其生物活性原材料就是鐵蛋白單克隆抗體。而市場現有的鐵蛋白單克隆抗體質量水平參差不齊，嚴重限制了試劑盒的質量。

鑒于此，有必要開發出高質量的鐵蛋白單克隆抗體，以滿足試劑盒的質量要求。

發明內容

本發明的第一目的是提供一種雜交瘤細胞株3F6，保藏于中國典型培養物保藏中心(China Center for Type CultureCollection，簡稱CCTCC)，雜交瘤細胞株3F6保藏編號是CCTCC NO:C2019173，能夠分泌特異性識別人鐵蛋白輕鏈的單克隆抗體FTL-McAb1。

本發明的第二目的是提供一種由雜交瘤細胞株3F6所分泌的特異性識別人鐵蛋白輕鏈的單克隆抗體FTL-McAb1。

本發明的第三目的是提供特異性識別人鐵蛋白輕鏈的單克隆抗體FTL-McAb1在人鐵蛋白檢測試劑盒中的用途。

本發明的第四目的是提供特異性識別人鐵蛋白輕鏈的單克隆抗體FTL-McAb1制備的人鐵蛋白免疫檢測試劑盒。

作為優選，所述人鐵蛋白免疫檢測試劑盒，包含了由雜交瘤細胞株3F6所分泌的特異性識別人鐵蛋白輕鏈的單克隆抗體FTL-McAb1。

細胞保藏：