[發(fā)明專利]一種提高北美冬青抗氧化能力的研究方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910706966.X
• 申請日: 2019-08-01
• 公開（公告）號: CN110810101A
• 公開（公告）日: 2020-02-21
• 發(fā)明（設計）人: 何漪;余敏芬;何立平;李東賓;王曉飛;閆道良;袁虎威;鄭炳松
• 申請（專利權）人: 浙江農(nóng)林大學
• 主分類號: A01G17/00
• 分類號: A01G17/00;A01G7/06;G01N33/00
• 代理公司: 杭州中利知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 33301
• 代理人: 韓洪

1.一種提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：包括以下步驟：

S1.材料選擇：選取生長一致的2個北美冬青品種2年生扦插苗，三月下旬將苗木全部移栽到同一規(guī)格塑料盆中，移栽后的苗木在溫室大棚中緩苗2個月；

S2.褪黑素處理：在六月中旬選擇健康、長勢一致的2個品種北美冬青扦插苗各18株，每個品種隨機分成兩組，每組各9株，其中一組噴施褪黑素，另一組則噴施等量清水作為對照；

S3.干旱脅迫處理：待褪黑素處理結束之后兩組同時進行相同的干旱脅迫處理，均設置3個水平，每個水平處理3株北美冬青，其土壤相對含水量分別為田間最大持水量的80-85％、50-55％和35-40％；

S4.采樣保存：當土壤相對含水量達到相應的干旱脅迫條件時記為實驗采樣的第0天，在處理后的第0、7、30天采集新鮮葉片，放到液氮中速凍，保存于-80℃超低溫冰箱中用于后續(xù)實驗的指標測定；

S5.測定指標：超氧化物歧化酶、過氧化物酶活性分別采用T-SOD試劑盒、POD試劑盒進行測定，丙二醛含量采用硫代巴比妥酸法測定，每個指標測定3個重復；

S6.數(shù)據(jù)處理與分析：采用Excel進行數(shù)據(jù)處理分析，SPSS19.0軟件進行方差分析和Duncan多重比較，用SigmaPlot12.5軟件作圖，對測定的數(shù)據(jù)進行整理并分析；

S7.抗旱性綜合評價：用隸屬函數(shù)法對2個北美冬青品種的抗旱性進行綜合評價。用于抗旱性分析的隸屬函數(shù)值[X(μ1)，X(μ2)]計算方程為：

X(μ1)＝(X-X_min)/(X_max-X_min) (1)

X(μ2)＝1-(X-X_min)/(X_max-X_min) (2)

式中，X為某一北美冬青品種某一指標的測定值，X_max和X_min分別為所有北美冬青品種該指標的最大值和最小值。

2.如權利要求1所述的一種提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：所述S1中的塑料盆選取的規(guī)格為：口徑16cm，深度15cm，并且每盆內(nèi)定植1株，每盆裝栽培土壤1.7kg，由田園土和營養(yǎng)基質按3:1混勻而成。

3.如權利要求1所述的一種提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：所述S2中為避免強光對褪黑素的影響，外源褪黑素處理時每2天于傍晚17:30噴施一次100μmol·L^-1褪黑素，共噴3次，噴施以葉片、葉背沾濕不滴落為度。

4.如權利要求1所述的一種提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：所述S3中干旱脅迫處理通過自然干旱至設定土壤相對含水量范圍，每天于早上7:30和傍晚17:30采用稱重法補水控水并記錄。

5.如權利要求1所述的一種提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：所述S5的測量指標還包括可溶性糖含量采用蒽酮比色法測定，可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍法測定，每個指標測定3個重復。