[發明專利]一種檢測霉酚酸的試紙條、試劑盒及試紙條的制備方法

有效

• 申請號: 201910682034.6
• 申請日: 2019-07-26
• 公開（公告）號: CN110376386B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 周建平;周裕軍;許秀麗
• 申請（專利權）人: 北京丹大生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 董大媛

1.一種檢測霉酚酸含量的試紙條，包括底板和在底板表面順次搭接的樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜和吸水紙，其特征在于，

所述樣品墊經樣品墊處理液處理，所述樣品墊處理液包括緩沖溶液、活性蛋白和表面活性劑；所述樣品墊處理液中的緩沖溶液選自PBS緩沖液、TRIS緩沖液和甘氨酸緩沖液中的一種或幾種；所述樣品墊處理液中的活性蛋白選自牛血清白蛋白、酪蛋白和卵清蛋白中的一種或幾種；所述樣品墊處理液中的表面活性劑選自吐溫20、吐溫80和Txiton-100中的一種或幾種；

所述玻璃纖維膜經玻璃纖維膜處理液處理；所述玻璃纖維膜處理液包括基礎溶液和以下濃度的組分：聚乙二醇6000 0.5~5g/L；甘露醇 3~15g/L；明礬0.1~1.5g/L；氯化鈉0.8%~1.0%；所述基礎溶液選自PBS緩沖液，TRIS緩沖液，甘氨酸緩沖液中的一種或幾種；

所述玻璃纖維膜上包被霉酚酸特異抗體偶聯物，所述霉酚酸特異抗體偶聯物的質量濃度為0.1~0.3%，所述霉酚酸特異抗體偶聯物的包被濃度為0.5~1mg/mL；所述霉酚酸特異抗體偶聯物中的偶聯物為膠體金顆粒或熒光微球；

所述硝酸纖維素膜上設置檢測線和質控線，所述檢測線上噴涂霉酚酸蛋白偶聯物，所述霉酚酸蛋白偶聯物的濃度為1~3mg/ml，噴涂量為1~3μL/cm；

當所述試紙條用于檢測全血時，在所述樣品墊和烘干的玻璃纖維素膜之間還包括濾血膜。

2.權利要求1所述試紙條的制備方法，包括以下步驟：

1）用樣品墊處理液處理所述樣品墊獲得處理后的樣品墊；

2）將霉酚酸單克隆抗體與偶聯物混合，偶聯后，進行封閉獲得霉酚酸特異抗體偶聯物；將所述霉酚酸特異抗體偶聯物噴涂于處理后的玻璃纖維膜上，獲得包被霉酚酸特異抗體偶聯物的玻璃纖維膜；

3）向所述硝酸纖維素膜的檢測線上噴涂霉酚酸蛋白偶聯物，質控線上噴涂羊抗鼠IgG；獲得噴涂有檢測線和質控線的硝酸纖維素膜；

4）將所述處理后的樣品墊、包被霉酚酸特異抗體偶聯物的玻璃纖維素膜、設置有檢測線和質控線的硝酸纖維素膜和吸水紙順次搭接粘貼在底板表面獲得試紙條；

步驟1）、步驟2）和步驟3）之間無時間順序限定。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟2）中所述偶聯的體系中霉酚酸單克隆抗體的濃度為100~500μg/mL；所述偶聯的時間為2.5~3.5h。

4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟2）中所述霉酚酸蛋白偶聯物與噴涂緩沖液混合后進行噴涂；所述噴涂緩沖液的組分與玻璃纖維膜處理液相同。

5.一種包括權利要求1或2任意一項所述的試紙條的試劑盒，其特征在于，還包括霉酚酸質控品。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述霉酚酸質控品通過將霉酚酸純品與凍干緩沖液混合、凍干獲得。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述凍干緩沖液包括基礎溶液和以下濃度的組分：聚乙二醇2~6g/L，海藻糖3~8g/L，甘露醇5~20g/L，聚乙烯吡咯烷酮1wt%；所述基礎溶液選自TRIS緩沖液、磷酸緩沖液、硼酸緩沖液或磷酸鹽緩沖液；所述基礎溶液的pH值為7.6~8.6；所述基礎溶液中溶質的濃度為50~200mmol/L。