[發明專利]一種前列腺癌早期診斷方法

在審

• 申請號: 201910673909.6
• 申請日: 2019-07-24
• 公開（公告）號: CN112285349A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 曹智;王富博;吉進;徐歡;楊悅;許亞龍;陳希;何靜怡;孫穎浩
• 申請（專利權）人: 上海長海醫院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/543;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種前列腺癌早期診斷方法，其特征在于應用基于體液中PSMA(前列腺特異性膜抗原)陽性的腫瘤細胞和細胞外微囊泡中AMACR(α甲基?；o酶A消旋酶)表達量來早期診斷前列腺癌。

技術領域

本發明涉及臨床診斷領域，具體涉及一種基于體液中PSMA(前列腺特異性膜抗原)陽性的腫瘤細胞和細胞外微囊泡中AMACR(α甲基?；o酶A消旋酶)表達量來早期診斷前列腺癌的方法。

背景技術

前列腺癌是男性最常見的惡性腫瘤之一，發病隨年齡增長而增加，全球范圍內居男性惡性腫瘤發病率的第3位，病死率的第6位。相比于歐美發達國家，我國的前列腺癌發病率相對較低，但隨著社會的不斷發展進步，近年來發病率呈持續快速上升趨勢，已成為影響中國男性健康的重要疾病之一。

目前，PSA檢測仍是前列腺癌早期篩查的主要方法，PSA＞4ng/ml的患者需行前列腺穿刺進一步排查；但隨著PSA在臨床上的廣泛應用，也發現其存在較多的局限性。PSA不具備腫瘤特異性，前列腺良性增生、前列腺炎和前列腺相關醫源性操作均可導致PSA升高。PSA在4.0-10.0ng/ml之間行前列腺穿刺的患者中，約75％穿刺陰性。2004年，Thompson研究發現17％的前列腺癌患者PSA在1.1-2.0ng/ml之間，14.9％的高級別前列腺癌PSA≤4.0ng/ml。探索一種具有高度敏感性、高度前列腺器官特異性和高度腫瘤特異性的標記物已經成為前列腺癌研究的重要方向。

AMACR是存在于線粒體和過氧化物酶體中的一種酶，它參與支鏈脂肪酸(包括降植烷酸)和膽汁酸的代謝，在支鏈脂肪酸和膽汁酸中間物-二羥膽甾烷醇酸和三羥基膽甾烷醇酸的β氧化中起著關鍵的作用，它能將α甲基支鏈脂?；o酶A(R型)催化轉化為其立體異構體(S型)，只有S位有2甲[烷]基的立體異構體才能通過過氧化物酶體(β氧化途徑的第一個酶)進行代謝。AMACR表達于正常腎臟和肝臟組織，以及包括前列腺癌、肝癌、腎癌、結直腸癌在內的多種腫瘤。2001年，Jiang等報道AMACR在入組的所有137例(100％)前列腺腺癌組織中均見表達，而對照組中88％(171/194)的良性前列腺組織中未見表達，提出AMACR是前列腺癌高度敏感和特異的陽性標記物。Beach報道82％(153/186)的前列腺癌組織中見AMACR表達。Magi-Galluzzi等發現在不同組別前列腺腺癌組織中，AMACR表達的敏感性在80-100％之間。其他研究還表明，對于那些很小的、非典型的腺體，AMACR診斷前列腺癌的靈敏度為82％～100％，特異性為79％-100％；對于穿刺標本的小腺癌和臨床診斷中有爭議的標本，AMACR的靈敏度可達94.5％-100％。目前，AMACR已被廣泛應用于前列腺癌的組織病理診斷，尚無在體液中應用AMACR早期診斷前列腺癌的報道。

AMACR在組織中可以有效地區分前列腺癌和良性疾病，但不是一種分泌蛋白且不具備前列腺組織特異性，這大大限制了開發其成為前列腺癌血液標志物的前景。PSMA是一種存在于前列腺上皮細胞的II型固有蛋白，主要表達于前列腺上皮細胞和腫瘤血管新生上皮細胞，在卵巢、乳房、腎臟、腦組織、腮腺等組織中有少量表達；具有較高的前列腺組織特異性。組織中的前列腺癌細胞可以脫落進入循環血形成循環腫瘤細胞，還可以分泌或脫落具有雙層膜結構的囊泡狀小體進入組織間液和循環血，形成細胞外微囊泡(EMV，包括外泌體、凋亡小體等)；循環腫瘤細胞和細胞外微囊泡攜帶了大量來自于前列腺癌細胞的蛋白質、核酸以及一些其他腫瘤細胞信息，細胞膜或囊泡表面表達PSMA，而細胞或囊泡內部存在AMACR。分選PSMA陽性的循環腫瘤細胞和細胞外微囊泡以檢測其內部的AMACR，在理論上具備了循環血可檢測性、器官特異性和腫瘤特異性，而敏感性需進一步實驗驗證。

有鑒于此，特提出此項發明。

發明內容

本發明提供了一種基于體液中PSMA(前列腺特異性膜抗原)陽性的腫瘤細胞和細胞外微囊泡中AMACR(α甲基?；o酶A消旋酶)表達量來早期診斷前列腺癌的方法。發明內容主要包括兩個方面：第一個方面是體液中PSMA陽性的腫瘤細胞和細胞外微囊泡的提??；第二個方面是AMACR蛋白的定量檢測。