[發明專利]一種推算金腰屬植物基因組大小的方法

有效

• 申請號: 201910542165.4
• 申請日: 2019-06-21
• 公開（公告）號: CN110274865B
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 覃瑞;劉虹;吳智華;廖瑞;董翔
• 申請（專利權）人: 中南民族大學
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14;G01N1/30
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 范盈

1.一種推算金腰屬植物基因組大小的方法，其特征在于，所述方法的步驟為：

(1).獲取葉片：選取生長茂盛的金腰屬植物，取其新鮮葉片1平方厘米左右，然后用蒸餾水清洗干凈葉片表面附著的泥土，后續實驗操作過程需低溫操作在冰上進行；

(2).預處理：將洗干凈的葉片放入預冷的塑料培養皿中，加入0.5ml左右預冷的改良Hepes解離液，用鋒利的刀片一次性快速切碎，整個過程，材料須浸沒在解離液里，以便更好的游離細胞核；加入0.5ml左右預冷的改良Hepes解離液，游離細胞核，所述改良Hepes解離液為10mmol/L MgSO4·7H2O，50mmol/L KCl，5mmol/LpH 8的 Hepes，10mmol/L DTT，0.25％Triton X-100，0.2mmol/L Tris·HCl；

(3).細胞核懸浮液制備：使用濾膜將懸浮液過濾至1.5ml的離心管中，加入1/10體積的DAPI溶液，避光染色30分鐘，所述濾膜為400目，所述DAPI溶液濃度為：10μg/ml；

(4).參照樣本的選擇：選取大豆新鮮葉片組織，與金腰屬植物做相同處理，制備成細胞核懸浮液，備用；

(5).鏡檢觀察：使用OLYMPUSBX51顯微鏡，紫外光源，20x鏡下觀察，找到熒光染色的白點，即為染色后的細胞核，然后用OLYMPUSDP73攝像頭拍照，保存照片；

(6).上機檢測：將制備的細胞核懸浮液移至上樣管，上機檢測，所述上機檢測的順序為：先檢測大豆細胞核懸浮液，再檢測金腰屬植物的細胞核懸浮液，所述大豆基因組大小為：950M；

(7).樣本基因組大小預測：通過比對參照樣本與目標樣本的峰值圖，推算出金腰屬植物的基因組大小；

所述金腰屬植物為大葉金腰。

2.權利要求1所述推算金腰屬植物基因組大小的方法在推算金腰屬植物基因組大小中的用途。