[發明專利]檢測H3K9甲基化和E-cadherin表達量試劑在制備肝癌預后評估試劑盒的應用

有效

• 申請號: 201910497621.8
• 申請日: 2019-06-10
• 公開（公告）號: CN110221072B
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 樊紅;錢言言;李懿萍;鄭楚騫;劉敏
• 申請（專利權）人: 東南大學
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/577
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 朱欣欣

本發明涉及檢測H3K9me2、H3K9me3和E?cadherin表達量試劑在制備肝癌預后評估試劑盒的應用，從而可以通過對肝癌預后預測，并利用免疫組化化學技術檢測H3K9me2、H3K9me3和E?cadherin的表達水平，從而獲得預測肝癌預后情況，且H3K9me2、H3K9me3和E?cadherin的引入方式簡單，整個預測評估簡便易行，可行性高。

技術領域

本發明涉及一種檢測H3K9me2、H3K9me3和E-cadherin表達量試劑在制備肝癌預后評估試劑盒的應用 ，屬于生物醫學領域，特別是涉及醫學診斷領域。

背景技術

原發性肝癌（以下簡稱肝癌）是我國最常見的惡性腫瘤之一，統計資料表明，全世界每年約45%新發病的肝癌新發病例在我國大陸。近20年來肝癌的病死率又有上升趨勢，已成為我國第2位惡性腫瘤致死原因，可見我國肝癌高發的形勢十分嚴峻。肝癌患者病死率高主要是因為目前尚無有效的靶向藥物，同時，由于而且肝癌患者的遺傳基礎不同，同樣的化療用藥后可能形成具有明顯差異的療效，因此針對不同患者給予個體化的治療方案迫在眉睫。但目前國內外尚沒有能夠有效進行術后指導治療方案制定及預后預測評估的技術手段。

專利CN108957004A中公開了檢測H3K9me2和H3K36me3表達量的試劑在制備胃癌預后評估試劑盒中的應用，在此基礎上，發明人及所在課題組繼續對其他疾病的術后預后預測的技術手段進行深入研究。

發明內容

本發明的目的在于針對肝癌提供一種可靠的預后評估試劑盒，從而可以監控肝癌患者的預后情況，使其能夠及時就診；同時利用預后評估結果制定個體化治療方案，合理應用化療藥物，避免無效的化療，有效提高患者生存期。

為了實現上述發明目的，我們公開了檢測H3K9me2、H3K9me3和E-cadherin表達量的試劑在制備肝癌預后評估試劑盒的應用 。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

檢測H3K9me2、H3K9me3和E-cadherin表達量的試劑在制備肝癌預后評估試劑盒的應用 。 作為本發明的一種改進，所述試劑盒采用免疫組化方法檢測H3K9me2、H3K9me3和E-cadherin在肝癌組織中的表達量。

作為本發明的一種改進，所述檢測試劑主要是由單克隆抗體、HRP標記二抗和組化試劑盒DAB顯色劑組成。

作為本發明的一種改進，所述單克隆抗體為H3K9me2單克隆抗體和/或H3K9me3單克隆抗體和/或E-cadherin單克隆抗體。

作為本發明的一種改進，所述試劑盒中包含有檢測生物樣品中檢測H3K9me2和/或H3K9me3和/或E-cadherin表達量的試劑，用于該檢測的生物樣品為福爾馬林固定和/或石蠟包埋的肝癌組織。

作為本發明的一種改進，該應用包括以下步驟：利用本試劑盒中由單克隆抗體、HRP標記二抗和組化試劑盒DAB顯色劑對福爾馬林固定和/或石蠟包埋的肝癌組織切片進行免疫組化染色，并利用免疫組織化學技術檢測H3K9me2、H3K9me3和E-cadherin的表達水平。

并且，進一步的我們公開了檢測H3K9me2表達量的試劑在制備肝癌預后評估試劑盒中的應用，以及檢測H3K9me3表達量的試劑在制備肝癌預后評估試劑盒中的應用。

肝癌患者的生存期與H3K9me2、H3K9me3和E-cadherin的表達有關，可以通過檢測患者這些該基因的表達水平指導臨床肝癌化療用藥，提高療效。據此，我們提出H3K9me2、H3K9me3和E-cadherin基因檢測可以應用于肝癌預后判定與化療耐藥評估。從而可以精確地預測肝癌預后，并且可以基于預測的預后有效地建立最佳的個體治療方案，以顯著減少由肝癌引起的死亡。

在本發明中我們公開了對H3K9me2、H3K9me3和E-cadherin采用免疫組化方法檢測。