[發(fā)明專利]一種檢測(cè)水稻上井岡霉素殘留的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910473350.2
• 申請(qǐng)日: 2019-05-31
• 公開（公告）號(hào): CN110274971A
• 公開（公告）日: 2019-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 查欣欣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇恒生檢測(cè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京常青藤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32286
• 代理人: 金迪

本發(fā)明提供一種檢測(cè)水稻上井岡霉素殘留的方法，包括如下步驟：S1：樣品處理：直接量取田水樣品溶液；稱取一定量的植株、稻殼、土壤或糙米樣品，置于離心管中，加水浸潤(rùn)后超聲處理，再加入甲醇回旋震蕩提取，然后離心處理后吸取上層清液，重復(fù)上述步驟1?3次，合并上層清液得到樣品溶液；S2：樣品溶液濃縮：各樣品溶液利用層析柱進(jìn)行吸附收集，洗脫液利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮；S3：檢測(cè)：田水樣品的濃縮液過濾處理后，利用高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)；植株、稻殼、土壤和糙米的樣品濃縮液經(jīng)過濾處理后，利用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明的準(zhǔn)確度高、精密度好、檢測(cè)限低，回收率達(dá)到100±30％，符合農(nóng)藥殘留量分析與檢測(cè)的技術(shù)要求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)藥殘留分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種檢測(cè)水稻上井岡霉素殘留的方法。

背景技術(shù)

井岡霉素是由水鏈霉菌井岡變種產(chǎn)生的水溶性抗生素，其有效成分為A、B、C、D、E、F共6種組分，其中井岡霉素A是其主要的有效成分，一般也是以井岡霉素A的含量來(lái)表示產(chǎn)品的規(guī)格和質(zhì)量。井岡霉素是我國(guó)獨(dú)立自主研發(fā)的生物源殺菌劑，主要用于防治水稻紋枯病，具有強(qiáng)內(nèi)吸性，兼具保護(hù)和治療的作用，是我國(guó)南方水稻區(qū)用于防治水稻紋枯病的主要藥劑品種。目前，對(duì)于一些難以在作物中提取的目標(biāo)農(nóng)藥，用通用的方法往往無(wú)法排除基質(zhì)干擾或者達(dá)不到很好的提取效果，也就導(dǎo)致相應(yīng)的檢測(cè)效果大打折扣，無(wú)法實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的測(cè)定。而且井岡霉素A是氨基糖苷類化合物，分子中含有多個(gè)極性基團(tuán)，難于氣化，不能直接進(jìn)行氣相色譜分析，而一般對(duì)水稻上井岡霉素殘留僅是通過土壤、田水、植株、糙米或稻殼等單一基質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，最終檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和代表性存在一定偏差。因此，急需一種能夠解決現(xiàn)有問題的檢測(cè)水稻上井岡霉素殘留的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種檢測(cè)水稻上井岡霉素殘留的方法。

本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

一種檢測(cè)水稻上井岡霉素殘留的方法，包括如下步驟：

S1：樣品處理

田水樣品的處理：直接量取田水樣品溶液；

植株、稻殼樣品的處理：稱取2.5g植株樣品或稻殼樣品，置于50mL離心管中，加入15mL水浸潤(rùn)后超聲60min，再加入10mL甲醇回旋震蕩提取60min，然后再在轉(zhuǎn)速4000r/min下，離心處理5min后吸取上層清液，重復(fù)上述步驟1-3次，合并上層清液得到植株或稻殼的樣品溶液；

土壤、糙米的處理：稱取5g土壤樣品或糙米樣品，置于50mL離心管中，然后加入15mL水浸潤(rùn)后超聲60min，再加入10mL甲醇回旋震蕩提取60min，然后再在轉(zhuǎn)速4000r/min下，離心處理5min后，吸取上層清液，重復(fù)上述步驟1-3次，合并上層清液得到土壤或糙米的樣品溶液；

S2：樣品溶液濃縮

樣品溶液的濃縮：將各樣品溶液調(diào)節(jié)pH值為2-3，然后利用層析柱進(jìn)行吸附收集，依次用pH3.5磷酸鹽緩沖溶液和乙醇淋洗去除雜質(zhì)，再用洗脫劑進(jìn)行洗脫，所得洗脫液利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮近干，再用氮?dú)饣蚩諝獯蹈?，定量加?mL的pH7.0磷酸氫二鈉-磷酸氫鉀緩沖溶液，超聲溶解得到各樣品濃縮液；

S3：檢測(cè)

田水的樣品濃縮液利用0.22μm親水性PTFE濾膜過濾后，利用高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)；植株、稻殼、土壤或糙米的樣品濃縮液也利用0.22μm親水性PTFE濾膜過濾后，利用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行檢測(cè)。

優(yōu)選的，田水的樣品濃縮液利用高效液相色譜按照下述液相色譜條件進(jìn)行檢測(cè)：島津LC-20AT液相色譜儀，配紫外檢測(cè)器(UVD)；色譜柱：ODS-SP(4.6×250mm 5μm)；流動(dòng)相：甲醇和pH7.0的5mmol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖溶液的體積比為2:98；流速：0.7mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm；進(jìn)樣量：20μL。