[發明專利]一種檢測試劑板及檢測MMP-3含量的試劑盒及其檢測方法

在審

• 申請號: 201910447625.5
• 申請日: 2019-05-27
• 公開（公告）號: CN110068680A
• 公開（公告）日: 2019-07-30
• 發明（設計）人: 陳功祥;伍傳麗;徐首丁;胡小芳;王名利;畢瑞春
• 申請（專利權）人: 杭州創新生物檢控技術有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/533
• 代理公司: 杭州裕陽聯合專利代理有限公司 33289
• 代理人: 金方瑋

本發明公開了一種檢測試劑板及檢測MMP?3含量的試劑盒及其檢測方法，檢測試劑板，包括：固定板，固定在固定板上并滴加樣品的樣品墊，固定在固定板上并接收樣品的層析膜，設置于層析膜上并固定有抗體的檢測線T，設置于層析膜上并固定有多克隆抗體的質控線C，設置于樣品墊和層析膜之間并固定有熒光標記的抗體的結合墊，連接于層析膜并固定在固定板上的吸水層；檢測方法應用固相熒光免疫層析法，定量檢測臨床血清或血漿等樣本中的MMP?3含量，檢測速度快；使用的MMP?3抗體量少，降低試劑盒價格；且儀器小型化，適用于門診，急診，小型的醫療機構。

技術領域

本發明涉及生物醫學檢測領域，特別是一種檢測試劑板及試劑盒及其檢測方法。

背景技術

目前類風濕關節炎(RA)早期診斷方法主要有臨床癥狀表現確診，影像學檢查，類風濕因子(RF)檢測，抗環瓜氨酸(CCP)抗體檢測等方法。基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)產生于滑膜細胞和軟骨細胞，其基質特異性是構成軟骨的蛋白多糖，作為與類風濕關節炎(RA)關節組織破壞相關的酶而受到關注。

目前極少數試劑盒通過檢測臨床血液等樣本中MMP-3含量，來診斷類風濕關節炎，且均為液相的膠乳免疫比濁法。免疫比濁法的缺點在于：(1)抗體用量大，導致臨床費用比較高；(2)檢測需要在抗原抗體反應達到平衡后進行，耗時較長；(3)需要配套相應的大型生化分析儀進行使用，儀器費用高，占地面積比較大，僅大型醫療機構能夠使用。

市場需要一種通過采集臨床血液等樣本檢測MMP-3含量的產品和方法，本發明解決這樣的問題。

發明內容

為解決現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種檢測試劑板及檢測MMP-3含量的試劑盒及其檢測方法，本發明應用固相熒光免疫層析法，定量檢測臨床血清或血漿等樣本中的MMP-3含量，檢測速度快；使用的MMP-3抗體量少，降低試劑盒價格；且儀器小型化，適用于門診，急診，小型的醫療機構。

為了實現上述目標，本發明采用如下的技術方案：

一種檢測試劑板，包括：固定板，固定在固定板上并滴加樣品的樣品墊，固定在固定板上并接收樣品的層析膜，設置于層析膜上并固定有抗體1的檢測線T，設置于層析膜上并固定有多克隆抗體的質控線C，設置于樣品墊和層析膜之間并固定有熒光標記的抗體2的結合墊，連接于層析膜并固定在固定板上的吸水層。

前述的一種檢測試劑板，層析膜為硝酸纖維素膜。

前述的一種檢測試劑板，抗體1為第二種鼠抗人基質金屬蛋白酶-3抗體，抗體2為結合有納米熒光微球的第一種鼠抗人基質金屬蛋白酶-3抗體。

前述的一種檢測試劑板，第二種鼠抗人基質金屬蛋白酶-3抗體的細胞株克隆號為：Clone#10D6；所述第一種鼠抗人基質金屬蛋白酶-3抗體的細胞株克隆號為：Clone#50647。

前述的一種檢測試劑板，納米熒光微球為羧基化納米熒光微球，微球直徑100-400nm。

前述的一種檢測試劑板，結合墊為玻璃纖維膜。

一種檢測MMP-3含量的試劑盒，包括：檢測試劑板，質控品，校準卡；

檢測試劑板包括：固定板，固定在固定板上并滴加樣品的樣品墊，固定在固定板上并接收樣品的層析膜，設置于樣品墊和層析膜之間并固定有熒光標記的第一抗體的結合墊，連接于層析膜并固定在固定板上的吸水層，設置于層析膜上并固定有第二抗體的檢測線T，設置于層析膜上并固定有多克隆抗體的質控線C；

第一抗體為結合有納米熒光微球的第一種鼠抗人基質金屬蛋白酶-3抗體，第二抗體為第二種鼠抗人基質金屬蛋白酶-3抗體；

質控品為：含有50ng/ml的基質金屬蛋白酶-3抗原的Tris-HCl緩沖液；