[發明專利]納米銀的生物合成方法

有效

• 申請號: 201910443802.2
• 申請日: 2019-05-27
• 公開（公告）號: CN110257436B
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發明（設計）人: 趙洪新;劉鑫;錢玙呈;潘鏡宇
• 申請（專利權）人: 浙江理工大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12R1/645
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

本發明公開了一種納米銀的生物合成方法，包括以下步驟：梅奇酵母發酵液離心，取離心所得的上清液；將上清液加入至硝酸銀溶液中形成反應體系，所述反應體系中Ag⁺的終濃度為(10±2)mM；調節反應體系的pH為5.0±0.5，在暗環境中反應(6±0.5)d，得含有納米銀的膠體。采用本發明方法合成的生物納米銀具有良好的抑菌效果和生物相容性。

技術領域

本發明涉及納米銀的生物合成方法，特別是涉及利用梅奇酵母合成生物納米銀的方法。

背景技術

納米材料(Nano material)指三維空間中至少一維處于納米級，或以其為基本單元所構成的材料。納米銀(AgNPs)是極具開發價值的新一代納米材料，它不僅具有納米材料通常的理化性質，還具有獨特生物學和材料學特性，被廣泛應用于醫學、材料學等領域。生物納米銀(Bio-AgNPs)是利用生物法合成的納米銀材料，其具有合成條件溫和、環境友好、材料學特性優良等特點，又具有特殊的抑菌殺菌、生物兼容性優良等生物學特性，近年來受到研究人員的高度重視。

納米銀(AgNPs)的制備方法有物理合成法、化學合成法和生物合成法。最初納米銀主要用物理方法制備，通過固體分散技術(Solid dispersion)將單質銀(Ag)直接轉變為納米粒子。物理方法原理清楚、操作簡單，通過電磁、機械、激光等方法降低單質銀粒徑的尺寸，達到納米級(nm)，使銀粒子具有納米材料的理化性質。但隨著物理方法納米銀材料的應用，物理納米銀的缺點暴露出來，如尺寸控制困難、粒徑大小均一性差，及成本高等；化學合成法是通過控制化學反應條件，得到納米級粒徑尺寸的銀單質，但化學合成反應條件劇烈，化學廢液會造成環境污染，產物中也往往含有大量雜質；生物合成法是利用生物提取物或微生物發酵液與含有Ag⁺的溶液進行反應，經分離提純得到納米銀。生物方法合成的生物納米銀(Bio-AgNPs)，不但反應條件溫和，納米尺寸均勻，生物兼容性好，而且沒有環境污染，受到研究者的高度重視。

微生物具有生長速度快、培養簡便和繁殖速度快等特點，可以在短期內批量生產目標產物，在合成生物納米銀的材料來源中具有極大優勢。因此利用生物合成納米銀特別是微生物合成納米銀的新型生物合成方法極為重要。

梅奇酵母，目前已知的用途是：抑制果實采后病菌，例如對桃采后褐腐病菌、蘋果采后灰霉病菌、蘋果采后青霉病菌和梨采后青霉病菌具有抑制作用；對桃采后褐腐病、蘋果采后灰霉病、梨采后青霉病、蘋果采后青霉病具有抑制作用。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種納米銀(AgNPs)的生物合成方法，本發明利用梅奇酵母的發酵液合成納米銀(生物納米銀)，納米銀具有良好的抑菌效果。

為了解決上述技術問題，本發明提供一種納米銀(AgNPs)的生物合成方法，包括以下步驟：

1)、梅奇酵母發酵液離心，取離心所得的上清液；

2)、將上清液加入至硝酸銀溶液中形成反應體系，所述反應體系中Ag⁺的終濃度為(10±2)mM；

調節反應體系的pH為5.0±0.5，在暗環境中反應(6±0.5)d，得含有納米銀(生物納米銀)的膠體。

作為本發明的納米銀(AgNPs)的生物合成方法的改進：將梅奇酵母菌于PDB培養基中培養，所得的發酵液于(5000±500)rpm/min離心4～6分鐘；得上清液。

作為本發明的納米銀(AgNPs)的生物合成方法的進一步改進：將一接種環的梅奇酵母菌接種至100mL的PDB培養基中，于(200±50)rpm/min的搖床、(28±1)℃培養(72±4)h；得發酵液。

本發明所使用的梅奇酵母菌，為購自KCTC 27726的LPP-12Y(Metschnikowiasp.)。