[發明專利]一種從輔酶Q10母液中分離純化輔酶Q10的方法以及輔酶Q10粗品

在審

• 申請號: 201910405658.3
• 申請日: 2019-05-15
• 公開（公告）號: CN110002985A
• 公開（公告）日: 2019-07-12
• 發明（設計）人: 黃揚文;李小萍;羅強;金永發
• 申請（專利權）人: 麗珠集團（寧夏）制藥有限公司
• 主分類號: C07C46/10
• 分類號: C07C46/10;C07C50/28
• 代理公司: 北京超成律師事務所 11646
• 代理人: 高榮英

1.一種從輔酶Q₁₀母液中分離純化輔酶Q₁₀的方法，其特征在于，其包括：

將輔酶Q₁₀母液濃縮，獲得濃縮液；將所述濃縮液加入溶解用有機溶劑進行溶解，獲得溶解液；將所述溶解液加水進行水洗，攪拌后靜置分層，獲得有機相和水相；將所述有機相上層析柱進行硅膠吸附，用預洗用有機溶劑進行預洗，再用洗脫用有機溶劑進行洗脫，收集含輔酶Q₁₀的洗脫液；以及，對所述洗脫液進行濃縮結晶和重結晶，獲得輔酶Q₁₀粗品；

其中，所述洗脫用有機溶劑為異丙醚和正庚烷的混合物；所述洗脫用有機溶劑中異丙醚的質量百分數為7％～12％。

2.根據權利要求1所述的從輔酶Q₁₀母液中分離純化輔酶Q₁₀的方法，其特征在于，所述洗脫用有機溶劑中異丙醚的質量百分數為9％～11％。

3.根據權利要求1所述的從輔酶Q₁₀母液中分離純化輔酶Q₁₀的方法，其特征在于，所述預洗用有機溶劑包括正己烷、環己烷、正庚烷、石油醚和異丙醚中的任一種或者任意兩種的混合物，優選為正己烷和/或正庚烷；

優選地，所述預洗用有機溶劑的體積為所述層析柱的體積的4-6倍。

4.根據權利要求1所述的從輔酶Q₁₀母液中分離純化輔酶Q₁₀的方法，其特征在于，所述輔酶Q₁₀母液是通過將由輔酶Q₁₀發酵液過濾形成的濕菌渣烘干得到干菌渣，然后對所述干菌渣經提取分離結晶后獲得；

優選地，所述輔酶Q₁₀母液中，第一雜質的相對含量為6％～11％，第二雜質的相對含量為15％-30％，第三雜質的相對含量為1.0％-2.5％；所述洗脫液中，第一雜質和第二雜質的相對含量均不超過5％，第三雜質的相對含量不超過0.8％；其中，所述第一雜質的相對保留時間為0.65～0.71，所述第二雜質的相對保留時間為0.75～0.81，所述第三雜質的相對保留時間為0.89～0.93。

5.根據權利要求1所述的從輔酶Q₁₀母液中分離純化輔酶Q₁₀的方法，其特征在于，上柱的所述有機相中輔酶Q₁₀的含量為50～80mg/ml；

優選地，進行所述硅膠吸附時，控制每g硅膠對輔酶Q₁₀的吸附量為60-70mg；

優選地，上柱流速為0.5～0.8BV/h；

優選地，預洗和洗脫的流速為1.0～2BV/h。

6.根據權利要求1所述的從輔酶Q₁₀母液中分離純化輔酶Q₁₀的方法，其特征在于，在向所述濃縮液中加入所述溶解用有機溶劑后，升溫至65～70℃，攪拌溶解；

優選地，所述溶解用有機溶劑包括正己烷、環己烷、正庚烷、石油醚和異丙醚中的一種或多種的混合物，優選為正己烷和/或正庚烷；

優選地，所述溶解液中輔酶Q₁₀與所述溶解用有機溶劑的比例為40～80mg：1ml。

7.根據權利要求1所述的從輔酶Q₁₀母液中分離純化輔酶Q₁₀的方法，其特征在于，在對所述溶解液加水進行水洗時，加水的體積為所述溶解液的體積的0.2-0.3倍。