[發明專利]一種適用于血液中苯丙胺類藥物分析的QuEChERS前處理方法

在審

• 申請號: 201910362999.7
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號: CN110045053A
• 公開（公告）日: 2019-07-23
• 發明（設計）人: 劉洋;何小維;劉曉云;王平;陳金;王羽
• 申請（專利權）人: 華南理工大學;廣州正孚檢測技術有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍;馮振寧

本發明公開了一種適用于血液中苯丙胺類藥物分析的QuEChERS前處理方法。該方法使用QuEChERS提取試劑對血液中的苯丙胺類藥物進行有效提取，并用材料包對血液復雜基質進行凈化，最后進行樣本檢測分析。該方法主要包括血液樣本的采集、血液中苯丙胺及相關物質的提取、分離、凈化。該發明的方法所要求的血液樣本量最少可達到0.2 mL，最低檢測限可達0.3~1.0 ng/ml，單個樣本前處理在15分鐘內便可完成。該方法對于血液樣本中的毒藥物分析方法的操作簡單，所耗樣本量少，有效消除血液中復雜的基質干擾，回收率大大增加，靈敏度顯著提高，可廣泛應用于法醫毒物，法醫臨床檢測。

技術領域

本發明屬于QuEChERS前處理方法領域，具體涉及一種適用于血液中苯丙胺類藥物分析的QuEChERS前處理方法。

背景技術

血液作為臨床中最常規的生物檢材，能夠準確及時反映體內藥物濃度以及各藥物在靶器官的狀況，而廣泛應用于臨床監控、法醫毒物分析等多種領域中。在法醫毒物分析中，多以受害人的血液檢材為主，來監控獲取當事人的實時血藥濃度信息。

血液檢材中含有大量的有機物，其中蛋白質(血紅蛋白、血漿蛋白質及酶與蛋白類激素)、非蛋白含氮化合物(血液中除蛋白質以外的含氮物質，主要是尿素、尿酸、肌酸、肌酐、氨基酸、氨、肽、膽紅素)、糖以及其他有機物和維生素、脂類(包括類固醇激素)等有機物在儀器分析中常常也會干擾到目標物的分析。前處理方法往往是消除基質效應的最常用方法，目前在毒物分析中常用的樣品前處理技術有液液萃取、蛋白沉淀法、固相萃取法。液液萃取是根據物質在兩種互不相溶的液體(如水相、有機相)中分配系數的不同，從而達到萃取、分離的目的。但是液液萃取須在合適的pH值條件下進行，以使待測物呈分子狀態，因此需要調節不同的pH值，限制了其作為系統毒物分析的通用樣品前處理方法。蛋白沉淀是通過加入不同類型的蛋白沉淀劑如極性大的有機溶劑(如甲醇、乙腈等)、酸性沉淀劑、無機鹽、重金屬鹽等，從而達到沉淀蛋白的目的。它的優點是對于血漿樣品的前處理沒有選擇性，只要足夠量就可被測出。但是，蛋白沉淀的方法對于低濃度的樣本經常檢測不出，這對于系統毒物分析是個較大的不足，因為這樣容易造成中毒樣本的漏檢。固相萃取(SPE)能夠避免液液萃取中相分離不完全、難以自動化等缺點，但是固相步驟較多，處理較為繁瑣，耗時較長。

SF/Z JD0107004-2016《司法鑒定技術規范--生物檢材中苯丙胺類興奮劑、哌替啶和氯胺酮的測定》所述，取血液樣本2mL置于10mL具塞離心管中，加入10％氫氧化鈉溶液0.2mL，用乙醚3mL提取，渦旋混合、離心，轉移有機層至另一離心管，約60℃水浴中揮干，殘留物中加入100uL乙腈：流動相緩沖液(70:30)進行溶解，取5uL進行LC-MS/MS分析。以上方法存在以下缺點：(1)操作條件嚴格：液液萃取須在合適的pH值條件下進行，以使待測物呈分子狀態，在SF/Z JD0107004-2016中需要調節pH值。(2)操作不方便：使用乙醚液液萃取后會產生一定的乳化層，相分離不夠完全，上清層的分離取液因操作者各異而會產生較大誤差。(3)樣本用量相對多。

發明內容

本發明的目的是提供一種適用于血液中苯丙胺類藥物分析的QuEChERS前處理方法，該方法能有效提取血液樣本中的苯丙胺、甲基苯丙胺、搖頭丸等苯丙胺類相關物質，對復雜基質血液進行凈化，消除血液中復雜的基質干擾，使得回收率大大增加，靈敏度顯著提高，可以用于進行定性定量分析檢測。

本發明的目的通過以下技術方案實現。

一種適用于血液中苯丙胺類藥物分析的QuEChERS前處理方法，包括如下步驟：

1)向血液中加入提取試劑進行提??；所述提取試劑為含甲酸、甲醇、乙腈的混合有機試劑；

2)向步驟1)所得混合液中加入分離材料包，渦旋混合，離心；所述分離材料包含有研磨珠和無水硫酸鎂；