[發明專利]一種用于水樣中多種抗生素的檢測方法

在審

• 申請號: 201910361233.7
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號: CN110243953A
• 公開（公告）日: 2019-09-17
• 發明（設計）人: 魏志雄;劉丹丹;藍明雄;王昆鵬;廖瑜;鐘瑋
• 申請（專利權）人: 東莞市食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/08;G01N30/14
• 代理公司: 東莞市神州眾達專利商標事務所(普通合伙) 44251
• 代理人: 劉漢民

本發明公開了一種用于水樣中多種抗生素的檢測方法，該方法的檢測步驟包括：水樣經抽濾后取適量，加入Na₂EDTA并調節pH值，選用HLB小柱進行固相萃取，甲醇洗脫，洗脫液氮吹后復溶，采用高效液相色譜串聯質譜法進樣分析。本發明首次建立了同時對該多種抗生素定性及定量的檢測方法，該方法的靈敏度高，檢測結果準確，能滿足地表水樣中若干種目標抗生素在寬濃度范圍內的準確定量測定，具有良好的實用性。

技術領域

本發明屬于化合物檢測技術領域，尤其涉及是一種抗生素的檢測方法，該方法采用前處理、固相萃取及液質聯用檢測方法能實現水樣中痕量抗生素的富集、準確定性及定量檢測。

背景技術

抗生素也稱為抗菌素，在低微濃度下能有選擇地抑制或影響它種生物功能，主要用于治療各種細菌感染或抑制致病微生物感染，其用量大，應用范圍廣。90％以上的抗生素用于醫療及農業，不可避免地給自然環境帶來巨大壓力：人類和動物使用的抗生素約80％會以原藥、代謝產物等形式排出體外，由于污水截流不徹底等原因，其通過生活污水排放、養殖廢水排放、農業糞肥灌溉徑流等不同途徑進入環境水體，殘留的抗生素進入環境水體后，會給環境水體中的微生物帶來巨大的選擇性壓力，對生態系統中各類生物產生危害，還可能在環境和生物體中累積或者通過食物鏈富集，誘發和傳播各類抗生素耐藥菌及抗生素抗性基因，嚴重威脅人類健康。

近年來，在國外的不同環境水體中均檢測到抗生素殘留，國內的抗生素污染情況也不樂觀，多地地表水中檢出抗生素：如在長三角地區城市生活污水，養豬場和甲魚養殖場廢水等樣品中分別檢出了磺胺類、四環素類、氯霉素類等多種抗生素污染；我國北方典型市政污水存在四環素類抗生素污染，環渤海地區檢出14種磺胺類抗生素；我國的海河、長江入海口、黃浦江、珠江、遼河等河流的部分點位中均檢出抗生素，部分地表水取樣檢測抗生素含量驚人，其中珠江廣州段的污染尤為嚴重。但目前，我國關于抗生素污染監管力度較為薄弱，尚未開展水環境中抗生素污染狀況的系統調查工作，尚無水中抗生素檢測的法定標準。

因此，亟需一種應用于抗生素的污染情況的系統調查的檢測方法，為抗生素檢測標準方法的制定研究提供參考，來解決上述問題。

在發明專利申請號為CN201310247043.5的專利申請中，公開了一種水中痕量四環素類抗生素的檢測方法，其步驟包括：水樣過濾除去懸浮物，調節水樣pH為2-4；依次利用丙酮、甲醇、含乙酸銨的甲酸水溶液、超純水活化HLB固相萃取柱，取步驟1中的水樣過柱，將HLB固相萃取柱在氮氣保護下干燥，再用洗脫液洗脫HLB固相萃取柱，收集洗脫液在氮氣流下吹干，加入乙腈溶解殘留物；定量檢測痕量四環素類抗生素的濃度。但是，上述發明專利公開的水中痕量四環素類抗生素的檢測方法，只能檢測固定范圍的四環素類抗生素，無法解決復雜性水質中多種抗生素檢測。

發明內容

為解決上述問題，本發明的首要目的在于針對水樣中微量乃至痕量的抗生素污染物，提供一種用于水樣中多種抗生素的檢測方法，其檢測結果專屬、靈敏、準確，可用于地表水中18種抗生素的定性及定量檢測分析。

發明的另一個目的在于提供一種用于水樣中多種抗生素的檢測方法，該方法可應用于抗生素的污染情況的系統調查，為抗生素檢測標準方法的制定研究提供參考。

為實現上述目的，本發明的技術方案如下：

一種用于水樣中多種抗生素的檢測方法，其特征在于該方法包括以下步驟：

101、水樣的前處理：使用微孔濾膜對水樣進行過濾，取過濾后水樣，向過濾后水樣中加入Na₂EDTA并使其溶解，再用稀酸調節pH值至2.5-3.5，得到前處理水樣；

102、水樣中抗生素的富集：將前處理的水樣經自動固相萃取儀進行萃取，并選用經活化的HLB小柱進行痕量抗生素富集，后以甲醇洗脫，收集洗脫液，氮吹至干后復溶，濾過，作為待測液；