[發明專利]一種化合物、含有所述化合物的產品及其在γ-谷氨酰轉肽酶檢測中的用途

有效

• 申請號: 201910357300.8
• 申請日: 2019-04-29
• 公開（公告）號: CN110204476B
• 公開（公告）日: 2022-12-13
• 發明（設計）人: 李富友;周曉波;吳勇
• 申請（專利權）人: 復旦大學;上海泰輝生物科技有限公司
• 主分類號: C07D209/10
• 分類號: C07D209/10;C07D271/12;C07D311/84;C07D417/06;C07F9/572;C09K11/06;G01N21/31;G01N21/64
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 譚瑋

本發明涉及具有下述式(1)結構的化合物、含有所述化合物的產品及它們的制備方法和在γ?谷氨酰轉肽酶檢測中的用途：

技術領域

本發明屬于熒光檢測領域。具體地，本發明涉及一種化合物、含有所述化合物的產品及它們的制備方法和在γ-谷氨酰轉肽酶檢測中的用途。

背景技術

在臨床腫瘤切除手術過程中，對腫瘤部位的準確定位并切除有利于病人術后生活質量的保證及相對良好的預后。在臨床醫學診斷和基礎生物醫學研究中，組織切片分析被廣泛的用于確定切緣位置以及術后的病理分析。冷凍切片準確性較高，是目前臨床中用途最為廣泛的切片分析方法，然而這種方法比較耗費時間和人力，難以應用于術中腫瘤定位。熒光成像技術成像速度快、靈敏度高等，這些優點使熒光成像技術能夠對組織中與腫瘤相關的生物分子實現快速、準確的定量，進而達到對腫瘤組織快速診斷的目的。

γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)是一種分布在細胞膜上的蛋白酶，其在生物體內的谷胱甘肽的代謝過程中具有重要的作用。在臨床上，γ-谷氨酰轉肽酶是診斷肝膽疾病的重要指標，被廣泛用途于肝病及其它臟器疾病的診斷和預后檢測。組織局部微環境的γ-谷氨酰轉肽酶表達異常升高常常與一些惡性腫瘤相關，在肝癌、卵巢癌、肺癌、鱗狀細胞癌等腫瘤組織都都有檢測到γ-谷氨酰轉肽酶的高表達。因此，對生物樣品中γ-谷氨酰轉肽酶進行定量檢測具有重要的意義。免疫化學的方法是目前準確度和靈敏度最高的GGT檢測方法，但是其操作繁瑣，成本高，耗時較長；比色法是目前IFCC推薦使用的方法，其商業化用途最為廣泛，其問題在于無法用于對相對復雜的生物環境如活體組織中或者細胞GGT含量的測定。目前商品化的熒光檢測試劑盒主要是基于香豆素、萘酰亞胺等熒光分子的產品，請參見圖1(Luo Z等人ChemBioChem,2019,20,474-487)，這類熒光分子在相對復雜的生物樣品中容易受到背景熒光信號和組織散射的干擾，難以實現對生物樣品中GGT含量的準確檢測。Luo等人[c1]報道了多種不同結構的GGT檢測分子，這類分子通常是“Turn on”型熒光探針，其對GGT的響應呈現單個波段熒光強度升高的特點。這導致這類分子用于組織中GGT含量的檢測時，其檢測信號容易受到探針濃度的影響，使檢測的準確性降低。

因此，現有技術中的試劑盒都是采用比色法和熒光增強法對GGT進行檢測，這兩種方法在生物樣品(特別是組織)中應用時，難以消除探針濃度、激發光功率等外界環境因素對檢測信號的影響，難以對所述生物樣品(特別是組織) 中的GGT含量進行準確的檢測。相比于以單波長強度變化對待測物進行檢測的方法，比率熒光檢測方法在熒光檢測中通常是以一個波段的光信號作為內參，另一個波段的光信號作為檢測信號，以兩個波段的熒光強度的比值作為輸出信號，從而可以在一定程度上消除外界環境的變化對輸出信號數值的干擾。因此，在相對復雜的生物體系中，利用比率檢測方法對待測物進行檢測，具有更高的準確性，且以雙波長熒光比率變化作為檢測信號將有利于構建對復雜生物體系中的GGT 進行定量檢測的方法。目前，用于比率檢測GGT的熒光探針鮮有報道，并且這些熒光探針響應速度慢、熒光比率變化倍數低，因此這些探針難以用于對組織樣本中含量的檢測?，F有技術中存在對GGT檢測具有反應快速和高靈敏度的作為熒光探針的化合物以及含有所述化合物的新型的高靈敏度、抗干擾能力強的檢測生物樣品(特別是組織)中GGT的產品的迫切需求。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的目的在于提供一種新的作為熒光探針的化合物、含有所述化合物的產品及其制備方法和在生物樣品中(特別是組織)GGT 檢測中的用途。本發明熒光探針(即，本發明的式(I)化合物，下同)反應快速且具有高靈敏度，且含有本發明熒光探針的產品通過熒光比率檢測的方法對組織中GGT的含量進行檢測，它不僅可以在一定程度上消除外界環境對檢測信號的干擾，在檢測準確度上有很大的提升，而且其比率信號變化倍數能達到170 倍，這使得熒光探針的靈敏度得到顯著地提高。另外，更重要的是，本發明熒光探針對GGT的響應速度非?？欤?0min內即可完全響應，這使得本發明產品可以應用于旁床檢測(point-of-care testing)組織中的GGT含量。

在本發明的第一方面，提供一種化合物，所述化合物具有下述式(1)結構；