[發明專利]一種用于區分結核桿菌和BCG疫苗的sRNA標志物及其用途有效
| 申請號： | 201910304999.1 | 申請日： | 2019-04-16 |
| 公開（公告）號： | CN110093432B | 公開（公告）日： | 2022-06-28 |
| 發明（設計）人： | 付英梅;張鳳民;宋武琦;李愛梅;劉鑫一;房勇 | 申請（專利權）人： | 哈爾濱醫科大學 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/32 |
| 代理公司： | 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139 | 代理人： | 孫皓晨;馬鑫 |
| 地址： | 150081 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 區分 結核桿菌 bcg 疫苗 srna 標志 及其 用途 | ||
1.檢測sRNA標志物表達量的試劑在制備區分結核桿菌和BCG疫苗試劑中的用途，所述的sRNA標志物包括MTS0997、MTS1338以及MTS2823其中至少一種。
2.一種用于區分結核桿菌和BCG疫苗的引物組合在制備區分結核桿菌和BCG疫苗試劑中的用途，其特征在于，所述的引物組合包括用于檢測MTS0997、MTS1338以及MTS2823其中至少一種sRNA標志物的引物對，其中：
用于檢測MTS0997的引物對由上游引物和下游引物組成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
用于檢測MTS1338的引物對由上游引物和下游引物組成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
用于檢測MTS2823的引物對由上游引物和下游引物組成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
3.一種用于區分結核桿菌和BCG疫苗的實時熒光定量PCR試劑盒在制備區分結核桿菌和BCG疫苗試劑中的用途，其特征在于，所述的試劑盒中含有用于檢測MTS0997、MTS1338以及MTS2823其中至少一種sRNA標志物的引物對，其中：
用于檢測MTS0997的引物對由上游引物和下游引物組成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
用于檢測MTS1338的引物對由上游引物和下游引物組成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
用于檢測MTS2823的引物對由上游引物和下游引物組成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
4.如權利要求3所述的用途，其特征在于，所述的試劑盒中還含有Eva Green 2xqPCRMaster Mix。
5.如權利要求3所述的用途，其特征在于，用于區分結核桿菌和BCG疫苗時，實時熒光定量PCR體系配制為：EvaGreen 2xqPCR MasterMix 10μL，用于檢測MTS0997、MTS1338或MTS2823的上下游引物各0.6μL，cDNA模板2μL，加去離子水補充體積至20μL。
6.如權利要求3所述的用途，其特征在于，用于區分結核桿菌和BCG疫苗時，實時熒光定量PCR的反應條件為：
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