[發明專利]一種獲得中國人群個體年齡的方法

有效

• 申請號: 201910294695.1
• 申請日: 2019-04-12
• 公開（公告）號: CN109943643B
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 黃志偉;辛葉;沈裕虎;朱倩;史萍;王蕾;王寒冬;陳冉冉;張曉宇;孔穎穎
• 申請（專利權）人: 東華大學;中國科學院西北高原生物研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所(普通合伙) 31233
• 代理人: 黃志達

本發明涉及一種獲得中國人群個體年齡的方法，提取樣本個體的DNA，進行DNA甲基化的亞硫酸氫鹽修飾；獲得所述DNA的hTERT基因的甲基化程度，建立甲基化程度和年齡的回歸模型，即可獲得中國人群個體年齡。本發明通過可靠的方法實現了利用血液或血痕對個體年齡的推斷。

技術領域

本發明屬于獲得年齡的方法領域，特別涉及一種獲得中國人群個體年齡的方法。

背景技術

個體年齡推斷一直是法醫學的重要研究課題之一，個體年齡的評估目前主要是依據對骨骼、牙齒等組織以及組織中各類物質的物理和化學特性等隨年齡增長的時序性變化。然而，獲得的年齡推斷結果受到評估者的主觀因素的影響，分析需要完整的骨骼或牙齒。如果沒有現場留下的形態特征，則無法估計生物樣本的年齡。而在許多的案件現場殘留的檢材只有血液或血痕，使用上述方法則無法進行個體年齡的推斷。

如何提供一種方法可以用于公安實戰中犯罪現場遺留的生物檢材血液或血痕樣本，實現對于血液或血痕來源個體年齡的推斷，將有利于快速鎖定嫌疑人范圍，為案件偵破提供線索，提高案件偵破速度，成為研究的熱點。

眾所周知，DNA甲基化是表觀遺傳中重要的一種化學修飾，是指DNA甲基轉移酶催化胞嘧啶環第5位碳原子形成5-甲基胞嘧啶(5mC)。人類單倍體基因組中約有5×10⁷個CpG，它廣泛分布在轉座元件、其他重復的DNA和大多數功能基因的編碼區，幾乎所有的甲基化胞嘧啶都發生在CpG二核苷酸。DNA甲基化在維持基因組遺傳物質穩定性和調控基因表達中起重要作用，與腫瘤，遺傳病，自身免疫性疾病和衰老的發生密切相關。DNA甲基化與年齡之間存在一定的相關性。一些研究表明，人類DNA甲基化的總體水平隨著年齡的增長而降低，并且在細胞分化過程中DNA維持甲基化的能力降低。

人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)是參與腫瘤發生和發展的重要蛋白酶，其啟動子區域的甲基化狀態影響其表達。hTERT基因啟動子含有大量CpG島，具有富含GC的序列，表明hTERT表達可能受甲基化調節。在腫瘤細胞和組織中，大多數hTERT啟動子是高甲基化的，但甲基化模式是復雜的。正常細胞或組織hTERT啟動子主要是無甲基或僅低甲基化。以前，對hTERT基因甲基化的研究主要集中在腫瘤發生發展，診斷和治療的機制上。

如CN 104357561 A公開了一種獲得中國人群女性個體年齡的方法和系統，它整合了四個基因上的11個CpG位點，在獲取了它們的甲基化率后，對這11個位點和年齡進行了回歸分析，建立了回歸模型。首先，在預測年齡的時候方法越簡單，才會更加的方便、快捷。四個基因，11個CpG位點，會加大工作量和工作難度，此外，它們建立的方法和系統主要針對的是女性群體，當面對男性群體時，方法可能就不會起作用。我們只是針對一個基因，使用最常規的PCR的辦法建立的數學模型，適用于大多數年齡段的個體。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種獲得中國人群個體年齡的方法，克服因為生物標志物和方法選擇不當，造成的預測年齡誤差比較大的缺陷。該方法通過MSP(甲基化特異性聚合酶鏈反應)和Real-time PCR(相對定量和絕對定量)方法探討了hTERT DNA甲基化與年齡預測的關系，擬合了三種基于甲基化檢測的年齡預測模型，對90例1-79歲供者的血液樣本進行了年齡預測，實現了利用血液或血痕對個體年齡的推斷。

本發明的一種獲得中國人群個體年齡的方法，包括：

(1)提取樣本個體的DNA，進行DNA甲基化的亞硫酸氫鹽修飾；

(2)獲得所述DNA的hTERT基因的甲基化程度，建立甲基化程度和年齡的線性回歸模型，即可獲得中國人群個體年齡。