[發(fā)明專利]一種白藜蘆醇的提取方法

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• 申請日: 2019-04-12
• 公開（公告）號: CN110066834A
• 公開（公告）日: 2019-07-30
• 發(fā)明（設計）人: 王中華
• 申請（專利權）人: 長沙市惠瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C07C37/68;C07C37/72;C07C39/21;A01H4/00;A01G22/25;A01C21/00
• 代理公司: 長沙中海宏圖專利代理事務所(普通合伙) 43224
• 代理人: 羅霞

1.一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于包括以下步驟：

1）粉碎：選擇高白藜蘆醇含量的虎杖為原料，經破碎后其顆粒在0.5cm以下，再經超微粒化球磨成300目左右；

2）煎煮：加水煎煮60分鐘，冷卻到35℃-40℃；

3）接種發(fā)酵：接種復合菌種母液，混合均勻，密封，恒溫發(fā)酵24-48h；

4）酶解：先加入5‰的仿人胃消化液，消化8-12h，加熱至100℃約30-60min；再調ph值為6.5-8，然后加入5‰仿人腸消化液，消化8-12h，加熱至100℃約30-60min；

5）萃取：粗濾，濾液通過超聲波和加有機溶劑萃取；

6）脫色干燥：萃取液經膜分離后再上柱脫色，濃縮比重為1.2-1.25，嘖霧干燥即得白藜蘆醇粉。

2.根據權利要求1所述的白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述的高白藜蘆醇含量的虎杖為白藜蘆醇含量在1%以上的虎杖原料。

3.根據權利要求1或2所述的白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述的高白藜蘆醇含量虎杖由以下方法培育：

1）虎杖繁育培植：選擇白藜蘆醇含量高的野生虎杖，進行植物培育，育種挑選出白藜蘆醇含量在0.9%以上的虎杖種株進行擴大栽培；

2）虎杖栽培施肥：虎杖栽培管理期間，使用專用農肥，該專用農肥是以虎杖提取加工后的廢渣60-70%，配合人工合成白藜蘆醇生產廢渣廢水30-40%，接種微生物發(fā)酵后加工而成。

4.根據權利要求3所述的白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述的植物培育為植物組織細胞培育，具體操作如下：

選擇野生虎杖的根或莖切段，經無菌水清洗干凈，用70%乙醇浸潤消毒10-30秒，在無菌室放入準備好的組培瓶內，在25℃條件下培養(yǎng)7-15天；

其中培育采用的培養(yǎng)基由以下方法制得：1）培養(yǎng)基制備:愈傷組織誘導培養(yǎng)基即SM培養(yǎng)基，蔗糖含量為10g/L、2,4-D含量2mg/L；2）試驗培養(yǎng)基:在SM培養(yǎng)基中加入吲哚乙酸、6-芐基氨基腺嘌呤和白藜蘆醇3g/L；3）培養(yǎng)基滅菌:將配好的培養(yǎng)基加入瓊脂加熱溶解,調至PH5.6-5.8,無菌分裝于100ml組培瓶中，每瓶約30ml,冷卻后蓋上組培瓶蓋，在1kg/C㎡壓力、121℃條件下滅菌20mim。

5.根據權利要求1所述的白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述的復合菌種母液為乳酸桿菌、復合酵母菌和芽孢桿菌等量混合而成。

6.根據權利要求1所述的白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述的仿人胃消化液為復合食用酸、胃蛋白酶和纖維素酶構成的混合酸，其中：所述復合食用酸由濃度為10%的食用鹽酸、濃度為10%的食用醋酸及濃度為15%乳酸按體積1:1:1的比例構成，該復合食用酸的ph值為1-2；所述胃蛋白酶活力1:400，按混合酸體積每1000ml加入3g；所述纖維素酶按混合酸體積每1000ml加入3g。

7.根據權利要求1或2或4或5或6所述的任一白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述的仿人腸消化為胰蛋白酶和木瓜酶解等量接入。