[發明專利]一種建立蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法

在審

• 申請號: 201910270546.1
• 申請日: 2019-04-04
• 公開（公告）號: CN109939221A
• 公開（公告）日: 2019-06-28
• 發明（設計）人: 楊慧盈;焦周光;周冬生;孫巖松;法云智;高波;邱業峰;干長嬌;郝淮杰;楊文慧;胡凌飛;趙月娥;于學東;熊小路;焦俊;殷喆
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: A61K38/16
• 分類號: A61K38/16;G01N33/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 何葉喧

本發明公開了一種建立蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法。本發明保護一種制備蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法，包括如下步驟：將蓖麻毒素溶液通過液體氣溶膠肺遞送給試驗動物，得到蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型。本發明還保護一種制備蓖麻毒素致毒動物模型的方法，包括如下步驟：將蓖麻毒素溶液通過液體氣溶膠肺遞送給試驗動物，得到蓖麻毒素致毒動物模型。本發明提供的動物模型的制備方法，給予蓖麻毒素的量可以精確定量、操作簡單、模型復制重復性好。本發明提供的動物模型可為后期經肺感染蓖麻毒素動物模型，為感染后藥物干預與治療奠定基礎。

技術領域

本發明涉及一種建立蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法，具體涉及一種通過液體氣溶膠肺遞送蓖麻毒素溶液制備蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法。

背景技術

蓖麻毒素屬于蛋白質毒素中的一種(具有兩條肽鏈的高毒性的植物蛋白)，是蓖麻油提取過程中的副產物。全球每年生產和加工至少1億公噸蓖麻籽以制備蓖麻油。除了用于蓖麻油生產的種植外，蓖麻植物在世界氣候變暖的同時也像雜草一樣生長，分布區域包括非洲、中東、印度和法國南部。從蓖麻籽中可以比較容易地生產出劇毒的蓖麻毒素，作為致II型核糖體失活家族的成員之一，蓖麻毒素是迄今已知的毒性最強的植物源毒素之一，經肺感染機體后可導致肺水腫、急性肺損傷、類急性呼吸窘迫綜合征等，最終導致死亡，且目前無有效治療藥物。

蓖麻毒素符合生物戰劑的標準，在國外已成為某些極端主義者的工具，其可能被用作恐怖分子武器并且易于通過氣溶膠形式在人群擴散，目前被美國國立衛生研究院(NIAID)列為生物防御戰略計劃研究的B類優先病原體。

發明內容

本發明的目的是提供一種建立蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法。

本發明保護一種制備蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法，包括如下步驟：將蓖麻毒素溶液通過液體氣溶膠肺遞送給試驗動物，得到蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型。所述試驗動物為小鼠。所述試驗動物為C57BL/6小鼠。所述蓖麻毒素溶液中，蓖麻毒素的濃度為1-4μg/mL。所述蓖麻毒素溶液單次遞送給試驗動物，遞送劑量為每只試驗動物50μL。所述制備蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法還包括如下步驟：檢測肺灌洗上清液中多種細胞因子濃度，如果肺灌洗上清液中所述多種細胞因子的濃度均顯著高于參比，說明動物模型建立成功。所述多種細胞因子具體可為11種細胞因子。所述11種細胞因子為GM-CSF、GRO-α、IL-6、IL-18、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2和TNF-α。所述多種細胞因子具體可為18種細胞因子。所述18種細胞因子為IFN-γ、IL-13、IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α、GM-CSF、IL-18、IL-22、GRO-α、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2、RANTES和Eotaxin。所述檢測肺灌洗上清液中多種細胞因子濃度，是在將蓖麻毒素溶液通過液體氣溶膠肺遞送給試驗動物的24小時后進行的。所述制備蓖麻毒素引起急性肺損傷的動物模型的方法還包括如下步驟：檢測血清中2種細胞因子濃度，如果血清中所述2種細胞因子濃度均顯著高于參比，說明動物模型建立成功。所述檢測血清中2種細胞因子濃度，是在將蓖麻毒素溶液通過液體氣溶膠肺遞送給試驗動物的24小時后進行的。參比可為給予PBS緩沖液的試驗動物。參比可為給予生理鹽水的試驗動物。所述制備蓖麻毒素引起的急性肺損傷動物模型的方法還包括如下步驟：檢測肺是否發生肺水腫和中性粒細胞浸潤，如果肺發生肺水腫和中性粒細胞浸潤，說明動物模型建立成功。