[發明專利]一種基于miR-35的抗白斑病飼料添加劑及其在水產養殖上的應用

在審

• 申請號: 201910249187.1
• 申請日: 2019-03-29
• 公開（公告）號: CN109907162A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發明（設計）人: 劉飛;田紅艷;王愛民;於葉兵;楊文平;楊成聰
• 申請（專利權）人: 鹽城工學院
• 主分類號: A23K10/18
• 分類號: A23K10/18;A23K10/26;A23K10/30;A23K10/37;A23K20/142;A23K20/147;A23K20/174;A23K20/22;A23K50/80;A61K33/38;A61P37/04;A61P31/20;A61K31/7105
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

本發明公開了一種基于miR?35的抗白斑病飼料添加劑及其在水產養殖上的應用。該添加劑包括以下按重量份數計的組分：miR?35 0.02?0.15份、納米銀溶液1?3份、幾丁質粉末20?34份、菜籽餅2?5份、檸檬酸鈉15?18份、酵母粉0.1?0.4份、貝粉1?3份、維生素E5?8份、玉米粉15?30份、維生素C1?3份、花生殼粉15?35份、桑葚葉提取物15?25份、蛋白粉15?24份、丙氨酸1?3份、含硫化合物0.5?4.2份。本發明利用對蝦的miR?35和納米銀溶液的系統作用，提高了miR?35的表達量，再用于飼料中喂養水產動物，從源頭上增強了各自的自身免疫力，降低了白斑病發生率。

技術領域

本發明屬于對蝦養殖領域，具體涉及一種基于miR-35的抗白斑病飼料添加劑及其在水產養殖上的應用。

背景技術

近年來，隨著國家對水產養殖業的重視，以及受國外水產養殖技術的影響，我國的水產養殖業發展迅猛。目前，出現在蝦體的疾病越來越多，其中白斑病尤為突出。而蝦體的消化系統短而且細，消化吸收能力差，所以對喂養方式和用品的要求有所提高。

蝦白斑癥病毒病的病原體是一種無包涵體病毒，感染病毒的蝦體癥狀病蝦，首先停止攝食，反應遲鈍，游泳不規則，時而在池邊慢游或伏臥于水底，空胃，體色正常或變紅(多為并發病)，頭胸甲易剝離，甲殼上面有白色圓點，嚴重者白點連成白斑，在顯微鏡下觀察白點呈重瓣的花朵狀。這是本病的重要特征。

MicroRNA(miRNA)是小的非編碼RNA，約由18-25個核苷酸組成，很多miRNA在不同物種中都是高度保守的。MiRNA是調控基因表達的重要因子，它們參與基因轉錄后水平的調控。它們通過種子序列與靶基因3’端非編碼區域(3’UTR)直接結合，從而抑制靶基因的翻譯或介導靶基因的降解。

蝦苗入池對環境的要求高，如何從蝦體本身上提高其免疫力，是值得探究的課題。

發明內容

針對現有的技術問題，本發明的目的在于提供一種基于miR-35的抗白斑病飼料添加劑及其在水產養殖上的應用，以miR-35為主要組分制備的添加劑，加入常規飼料中，喂養蝦或蟹類，提高了水產自身的免疫力，尤其適合用于幼體的喂養。

一種基于miR-35的抗白斑病飼料添加劑，包括以下按重量份數計的組分：miR-350.02-0.15份、納米銀溶液1-3份、幾丁質粉末20-34份、菜籽餅2-5份、檸檬酸鈉15-18份、酵母粉0.1-0.4份、貝粉1-3份、維生素E5-8份、玉米粉15-30份、維生素C1-3份、花生殼粉15-35份、桑葚葉提取物15-25份、蛋白粉15-24份、丙氨酸1-3份、含硫化合物0.5-4.2份。

作為改進的是，上述基于miR-35的抗白斑病飼料添加劑，包括以下按重量份數計的組分：miR-35 0.12份、納米銀溶液2份、幾丁質粉末28份、菜籽餅3份、檸檬酸鈉16份、酵母粉0.2份、貝粉2份、維生素E6份、玉米粉24份、維生素C2份、花生殼粉30份、桑葚葉提取物22份、蛋白粉20份、丙氨酸2份、含硫化合物3.1份。

作為改進的是，所述miR-35的堿基序列為SEQ ID NO.1：5’-AACUGUGAGAAGUUCCGGU-3’。

作為改進的是，所述蛋白粉為植物蛋白。

具體地，上述基于miR-35的抗白斑病飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟：

步驟1，將miR-35溶于磷酸鹽緩沖液中，加入納米銀溶液，37℃下攪拌后5-8分鐘，再加入幾丁質粉末，繼續攪拌后，噴霧干燥，得混合細粉A；

步驟2，將菜籽餅、檸檬酸鈉、酵母粉、貝粉、維生素E、玉米粉、維生素C、花生殼粉、桑葚葉提取物、蛋白粉、丙氨酸和含硫化合物混合，加入去離子水攪拌，均勻后，噴霧干燥的混合細粉B；

步驟3，將混合細粉A和混合細粉B投入擠出機中擠出母粒，即得添加劑。