[發明專利]一種生防菌株TMN-1及生防菌劑的制備方法和應用

有效

• 申請號: 201910243090.X
• 申請日: 2019-03-27
• 公開（公告）號: CN110257254B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: 丁偉;朱洪江;皮靜;馬云鵬;李石力;紀成隆;敖若寅
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/30;A01P1/00;C12R1/645
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 李歐;彭啟強

本發明涉及植物保護技術領域，尤其涉及一種生防菌株TMN?1及生防菌劑的制備方法和應用。本發明的生防菌株TMN?1為肉座菌屬真菌，含有生防菌株TMN?1的生防菌劑的制備為取煙草種植地區青枯病發病地塊健康煙株根際土，采用稀釋涂布平板法在孟加拉紅選擇性培養基上篩選出生防菌株TMN?1，將篩選出的生防菌株TMN?1在PDA培養基上進行活化，得到的純生防菌株TMN?1在PD培養基中于180rpm、28℃振蕩培養5天，于7000rpm離心8?10min，用無菌水調節孢子濃度為1×10⁸cfu/mL。本發明的生防菌劑應用于煙草種植中，能夠促進煙草健康生長，且還能夠改善土壤微生物群落結構，對煙草青枯病具有良好防治效果，能夠減輕煙草青枯病的危害。

技術領域

本發明涉及植物保護技術領域，尤其涉及一種生防菌株TMN-1及生防菌劑的制備方法和應用。

背景技術

煙草青枯病又稱為煙瘟，是由青枯雷爾氏菌引起的一種土傳性細菌病害，也是一種典型的維管束病害，最顯著的發病癥狀是枯萎，一旦發病可造成煙草全株死亡，是煙草的毀滅性病害之一，嚴重影響煙葉的產量。1864年在印度尼西亞首次報道了青枯菌對煙草的毀滅性危害。青枯病目前在我國煙草種植地區發生廣泛，河南、四川、重慶、貴州、云南等烤煙種植區域每年均有發生，且隨著連作年限的增加，連作障礙無法打破，導致土壤酸化加重，土壤肥力下降，土壤健康失去原有的平衡，作物不能將康生長，自身抵抗病害能力下降，加之土壤病原不斷累積，導致了煙草青枯病的爆發

目前為止，煙草青枯病的防治目前無有效手段或藥劑，化學防治為主要防治方法，但會帶來嚴重的環境問題；培育抗性品種是比較好的解決辦法，但我國地域廣，青枯病小種分化較多，變異迅速，抗性品種會快速的失去抗病性，并非長久之計。所以，如何尋求改良土壤，重塑土壤根際微生物生態群落結構，重新建立失去的土壤平衡，同時保證植株自身健康，提升植株自身抵抗病害能力的產品，是目前亟需解決的問題。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的是提供一種生防菌株TMN-1和生防菌劑的制備方法，制備得到的生防菌株TMN-1應用于煙草種植中，能夠促進煙草健康生長，且還能夠改善土壤微生物群落結構，對煙草青枯病具有良好防治效果，能夠減輕煙草青枯病的危害。

本發明通過以下技術手段解決上述技術問題：

本發明的目的是提供了一種生防菌株TMN-1，所述生防菌株TMN-1為肉座菌屬真菌，為哈茨木霉的有性型，已于2019年03月01日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC No.17188。

分析生防菌株TMN-1生物學特性，生防菌株TMN-1兼具促進植物健康生長且對煙草青枯病具有良好的防治效果，其能夠改善土壤微生物群落結構，減輕煙草青枯病的危害。

所述生防菌株TMN-1中含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

本發明的另外一個目的在于提供一種生防菌劑，所述生防菌劑中含有上述的生防菌株TMN-1。

本發明的另外一個目的在于提供一種生防菌劑的制備方法，所述制備方法如下：

取煙草種植地區青枯病發病地塊健康煙株根際土，采用稀釋涂布平板法在孟加拉紅選擇性培養基上篩選出生防菌株TMN-1，將篩選出的生防菌株TMN-1在PDA培養基上進行活化，得到的純生防菌株TMN-1在PD培養基中于180rpm、28℃振蕩培養5天，于7000rpm離心8-10min，用無菌水調節孢子濃度為1×108cfu/mL，得到生防菌劑。

進一步，所述孟加紅選擇性培養基包括以下重量份的原料：馬鈴薯200.0份、無水葡萄糖20.0份、瓊脂20.0份、蛋白胨5.0份、硫酸鎂0.5份、磷酸二氫鉀1.0份、孟加拉紅0.033份、氯霉素0.4份、蒸餾水1000份。