[發明專利]一種雙光子熒光探針的用途

有效

• 申請號: 201910228381.1
• 申請日: 2019-03-25
• 公開（公告）號: CN109946276B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 黃池寶
• 申請（專利權）人: 遵義師范學院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C09K11/06;C07D209/86
• 代理公司: 貴州派騰知識產權代理有限公司 52114
• 代理人: 谷慶紅

本發明涉及雙光子熒光探針技術領域，具體地說，涉及一種雙光子熒光探針的用途，所述雙光子熒光探針應用于細胞與組織成像中，探測脂筏含量以及分布動態，該探針能夠提高脂筏檢測的準確度、精密度、靈敏度、成像分辨率，為進一步防控阿爾茨海默癥和朊病毒病等神經退行性疾病提供新思路。

技術領域

本發明涉及雙光子熒光探針技術領域，具體地說涉及一種雙光子熒光探針的用途。

背景技術

脂筏(lipid raft)(10―100nm的膜片)是細胞質膜中富含鞘脂(鞘糖脂和鞘磷脂)和膽固醇的微區，參與細胞轉導和蛋白質轉運等細胞過程，與阿爾茨海默癥和朊病毒病等神經退行性疾病密切相關。具體的說，脂筏是剛性隔膜(有序液相：liquid-ordered phase,lo)，漂浮在甘油磷脂(無序液相：liquid-disordered phase,ld)的海洋中。其結構特點與組分適于蛋白質間的相互作用與構象轉化，參與許多細胞過程，如信號傳導、病原體侵入、膽固醇穩態、神經退行性疾病(阿爾茨海默癥和朊病毒病等)等。甘油磷脂由與磷酸基團相結合的極性頭部(親水端)和兩個非極性尾部(脂肪酸鏈，親脂端)組成，鞘磷脂為鞘氨醇的衍生物，這兩類脂極性較強；含有4個碳環且分子剛性很強的膽固醇帶有一個親水頭部(含一個羥基)，極性很弱，粘度很大。因此脂筏的極性要比甘油磷脂的海洋小得多，且粘度相對較小。

現有技術中，如專利號CN201611180454.7公開了一種可以實時原位以兩種熒光顏色清楚區分和同時成像細胞膜脂筏微區和非脂筏微區的單一熒光探針。該熒光探針是式(I)所述結構的化合物，其中R1表示2-乙氧乙基、氨基烷基、羥烷基或烷基；R2和R3表示烷基。該發明還公開了所述熒光探針在實時原位以紅綠兩種熒光顏色標記活細胞細胞膜上的脂筏和非脂筏微區中的應用。但該專利僅能夠用紅色熒光和綠色熒光對脂筏微區和非脂筏微區進行區分，但是對組織中脂筏的分布動態難以進行精準的表征。該發明所述熒光探針(簡稱文獻1探針)為吡啶鹽化合物，屬于離子型化合物，首先其熒光量子產率相當低；其次其熒光壽命比較短，一般不到200ps(1ps＝10^-12s)[參見文獻：(1)王筱梅等，中國科學(E輯)，32(1)：20－27；(2)雷虹等，物理，2003，32(1)：19－26]；再次其離子化合物的本性(強極性)與脂筏(弱極性)相容性差、親合力弱，依據為相似相溶原理；最后，其易于與核酸結合用作核酸探針[參見文獻：(1)Liu Y,Meng F F,He L W,Yu X Q,Lin WY.Chem.communications,2016,52(57)：8838—8841；(2)Song G F,Miao F,Sun Y M,Yu XQ,Sun J Z,Wong W Y.Sensors and Actuators B Chemical,2012,173(10):329—337]，因此易受核酸的干擾，產生假陽性。