[發明專利]一種精胺枝接化米糠多糖的制備方法以及基因載體

在審

• 申請號: 201910169890.1
• 申請日: 2019-03-06
• 公開（公告）號: CN109912727A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發明（設計）人: 劉梁;吳淑恒;陳新;熊學敏
• 申請（專利權）人: 武漢輕工大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12N15/87;A61K48/00;A61K47/36
• 代理公司: 深圳市世紀恒程知識產權代理事務所 44287
• 代理人: 胡海國

1.一種精胺枝接化米糠多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟S10、將米糠多糖與高碘酸鉀在20～30℃下攪拌反應使米糠多糖被氧化，得到氧化米糠多糖；

步驟S20、將氧化米糠多糖配制成第一溶液，將精胺配制成第二溶液，然后將所述第一溶液加入到所述第二溶液中形成待反應液，在20～30℃下攪拌反應20～26h，得到生成有氧化米糠多糖-精胺共軛物的混合液；

步驟S30、向所述混合液中加入硼氫化鈉后，在20～30℃下攪拌反應使所述氧化米糠多糖-精胺共聚物還原，得到透明的無色溶液；

步驟S40、對所述無色溶液進行提純和干燥，得精胺枝接化米糠多糖。

2.如權利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制備方法，其特征在于，步驟S10具體包括：

步驟S11、將米糠多糖配制成多糖水溶液，然后向所述多糖水溶液中加入高碘酸鉀，在20～30℃、避光條件下攪拌反應45～50h，得到反應液；

步驟S12、采用雙蒸水在3～5℃下對所述反應液進行透析40～50h，然后收集截留液進行冷凍干燥，得氧化米糠多糖。

3.如權利要求2所述的精胺枝接化米糠多糖的制備方法，其特征在于，步驟S11中：所述多糖水溶液中的葡萄糖基與所述高碘酸鉀的摩爾比為1：(1～1.5)。

4.如權利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制備方法，其特征在于，步驟S20中：所述待反應液中精胺與醛基的摩爾比為(1.0～1.5)：1。

5.如權利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制備方法，其特征在于，步驟S20中：所述硼酸鹽緩沖液的摩爾濃度為0.1～0.2mol/L、pH值為10.0～11.0。

6.如權利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制備方法，其特征在于，步驟S20包括：

步驟S21、將氧化米糠多糖溶解于雙蒸水中制成第一溶液，將精胺溶解于硼酸鹽緩沖液中制成第二溶液；

步驟S22、采用滴加的方式將所述第一溶液逐步滴加入所述第二溶液中混合形成待反應液，并在20～30℃下攪拌反應20～26h，得到生成有氧化米糠多糖-精胺共軛物的混合液。

7.如權利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制備方法，其特征在于，步驟S30具體包括：

向所述混合液中加入硼氫化鈉后，在20～30℃下攪拌反應45～50h后，再次加入硼氫化鈉并在20～30℃下攪拌反應20～25h，得到透明的無色溶液。

8.如權利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制備方法，其特征在于，步驟S40包括：

采用雙蒸水在3～5℃下對所述無色溶液進行透析40～50h，然后收集截留液進行冷凍干燥，得氧化米糠多糖，所述透析時選用的透析膜的截留分子量為3000～4000。

9.一種基因載體，其特征在于，所述基因載體包括精胺枝接化米糠多糖，所述精胺枝接化米糠多糖由如權利要求1至8任意一項所述的精胺枝接化米糠多糖的制備方法制得。