[發明專利]一種煙草抗腫瘤活性組分的提取方法及其應用

在審

• 申請號: 201910167595.2
• 申請日: 2019-03-06
• 公開（公告）號: CN109999101A
• 公開（公告）日: 2019-07-12
• 發明（設計）人: 蘇賢坤;楊慧;耿召良;曹軍;陳玉皎;張武華
• 申請（專利權）人: 貴州省煙草科學研究院;貴州貴安精準醫學研究院股份有限公司
• 主分類號: A61K36/81
• 分類號: A61K36/81;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種煙草抗腫瘤活性組分的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)預處理：對煙草原料進行烘干處理，以及將烘干處理后的煙草原料進行超微粉碎處理，得到煙草超微粉；

(2)常溫水提：在煙草超微粉中加入提取溶劑，在常溫條件下進行提取操作；對提取操作后的煙草超微粉進行離心處理，并收集離心處理后的沉淀物；步驟(2)中的提取溶劑為純化水；

(3)高溫水提：在步驟(2)中收集的沉淀物中加入提取溶劑，在90-100℃的提取溫度下進行濃縮提取操作；對濃縮提取操作后得到的濃縮提取液進行降溫處理、離心處理，并收集離心處理后的沉淀物；步驟(3)中的提取溶劑為純化水；

(4)甲醇提?。涸诓襟E(3)中得到的沉淀物中加入提取溶劑，在0-4℃的提取溫度下進行浸提提取操作，對浸漬提取物進行離心處理，并收集離心處理后的上清，將收集的上清進行旋轉蒸發濃縮烘干處理；步驟(4)中的提取溶劑為85-100％的甲醇；

(5)丙酮提?。涸诓襟E(4)中得到的沉淀物中加入提取溶劑，在0-4℃的提取溫度下進行浸提提取操作，對浸漬提取物進行離心處理，并收集離心處理后的上清，將收集的上清進行旋轉蒸發濃縮烘干處理，得到煙草活性組分；步驟(5)中的提取溶劑為85-100％的丙酮；

(6)煙草活性組分分離：在步驟(5)中得到的上清液進行濃縮烘干處理，配制樣品制備液相進行分離，分離得到的組分進行活性篩選，具有活性的組分再進一步分離；

(7)在步驟(6)中得到的具有活性組分的樣品，制備液相進行分離，分離得到的組分進行活性篩選，選取活性最強的組分；

(8)質譜分析：在步驟(7)中制備液相分離出來具有抗腫瘤活性的組分，質譜進樣，得到其所有可能性的結構式。

2.根據權利要求1所述提取方法，其特征在于，

步驟(1)中的烘干處理是將煙草原料放置在烘箱中進行烘干，使得烘干處理后的煙草原料的含水量小于5％，烘干溫度為50-60℃，烘制時間為4-8h；

和/或，步驟(1)中的超微粉碎處理是將烘干處理后的煙草原料，使用50-80目篩網的粉碎機進行粉碎處理，并對粉碎處理后的煙草原料，使用200-400目篩網的粉碎機進行粉碎處理，得到所述煙草超微粉。

3.根據權利要求1所述提取方法，其特征在于，

步驟(2)中加入提取溶劑的質量是所述煙草超微粉的質量的2-4倍；

和/或，步驟(2)中的提取操作是指將所述煙草超微粉和提取溶劑置于提取罐中，提取時間為0.5-3h；

和/或，步驟(2)中的離心處理是指：離心溫度為8-12℃，離心時間為0.5-1.5h，轉速為3000-6000rpm/min。

4.根據權利要求1所述提取方法，其特征在于，

步驟(3)中加入提取溶劑的質量是沉淀物的質量的1.2-2.4倍；

和/或，步驟(3)中的濃縮提取操作的提取時間為0.5-1.5h；

和/或，步驟(3)中的離心處理是指將降溫處理后的所述濃縮提取液置于離心瓶中，離心溫度為8-12℃，離心時間為0.5-1.5h，轉速為3000-6000rpm/min。

5.根據權利要求1所述提取方法，其特征在于，

步驟(4)中加入提取溶劑的質量是沉淀物的質量的1.5-2.5倍；

和/或，步驟(4)中的浸漬提取操作是指每隔0.5h攪拌一次，提取時間為12-24h；

和/或，步驟(4)中的離心處理是指將所述浸漬提取物置于離心瓶中，離心溫度為：3-5℃，離心時間為0.5-1.5h，轉速為3000-6000rpm/min；

和/或，步驟(4)中的濃縮烘干處理的溫度為60-70℃。