[發明專利]卡馬西平的高效液相檢測方法

在審

• 申請號: 201910149336.7
• 申請日: 2019-02-28
• 公開（公告）號: CN109884235A
• 公開（公告）日: 2019-06-14
• 發明（設計）人: 成立煒;湯城
• 申請（專利權）人: 上海藥明康德新藥開發有限公司
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 上海浦一知識產權代理有限公司 31211
• 代理人: 鄭權

本發明公開一種卡馬西平的高效液相檢測方法，其采用反相C18色譜柱、DAD檢測器，流動相A是甲酸—乙酸銨的水溶液和乙腈的混合溶液，流動相B是甲酸—乙酸銨的乙腈溶液和水的混合溶液，采用梯度洗脫。采用本發明的方法進樣3～5ul，能夠有效檢出卡馬西平及其有關物質，并且分離度R能達1.5以上，HPLC譜基線平穩，不發生漂移；本方法檢測時間短，只需3min即可完成高效液相檢測過程，本方法大大降低樣品耗量，提高了檢測效率，適合高通量篩選；能節省溶劑，降低成本；本發明的方法用于卡馬西平的含量測定，具有良好的線性關系，重現性高，在原料藥、制劑質量研究以及藥動學定量研究等方面具有意義。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及一種卡馬西平的高效液相檢測方法。

背景技術

卡馬西平(Carbamazepine)，是一類抗癲癇、穩定情緒類藥物，對大發作、局限性發作和混合型癲癇亦有療效。主要用于治療癲癇癥、躁郁癥以及三叉神經痛。卡馬西平具有很多副作用，其中包括：能危及生命的過敏反應，對三叉神經有毒，可能導致皮膚及內臟器官嚴重傷害，因此在治療期間對病人的血液藥物水平進行監測非常重要。

目前，檢測血漿中卡門西平血藥濃度的常用方法有：紫外分光光度法、熒光偏振免疫法、高效液相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜-質譜聯用法，這些方法中，液相色譜法為卡門西平的首選方法。以往檢測方法存在前處理復雜、干擾因素多、分析時間長、靈敏度不高、定性定量不夠準確的問題。

中國藥典2015年版，記載了卡馬西平的有關物質的檢測方法，其色譜條件為：以色譜條件與系統適用性試驗腈丙基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-四氫呋喃-水(120:30:850)為流動相(加入0.02％甲酸；0.05％三乙胺)，檢測波長為230nm，20uL進樣。另，現有技術已報道卡馬西平的含量測定方法，亦采用了腈丙基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，流動相A為50mmol/L磷酸二氫銨溶液，流動相B采用乙腈，梯度洗脫時間65min，進樣50uL，在215nm檢測。發明人按該方法對卡馬西平含量及其雜質進行測定，發現HPLC圖譜洗脫時基線有漂移，積分不準確，其用于定量分析時的精確度和準確度不高，且檢測需要65min以上，耗時長。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，提供一種檢測時間短、分離效果好、精確度和準確度更高的卡馬西平的高效液相檢測方法。

為解決上述技術問題，本發明提供的卡馬西平的高效液相檢測方法，其中，

色譜柱采用反相C18色譜柱；

檢測器采用DAD檢測器；

流動相包括流動相A和流動相B；流動相A是甲酸-乙酸銨的水溶液和乙腈的混合溶液，水溶液中甲酸體積濃度為0.01～0.03％，水溶液中乙酸銨濃度為0.5～1.5mM，水溶液與乙腈的體積比為100～95：0～5；流動相B是甲酸-乙酸銨的乙腈溶液和水的混合溶液，乙腈溶液中甲酸體積濃度為0.01～0.03％，乙腈溶液中乙酸銨濃度為0.5～1.5mM，乙腈溶液與水的體積比為100～95：0～5；

采用梯度洗脫，梯度洗脫程序按以下程序進行：0～0.01min，流動相B保持體積百分比為20％；0.01～2.10min，流動相B體積百分比由20％遞增至90％；2.10～2.11min，流動相B體積百分數由90％遞減至20％；2.11～3.00min，流動相B保持體積百分數為20％。

在一個優選的實施例中，流動相A是甲酸—乙酸銨的水溶液和乙腈的體積分數為95：5的混合溶液，流動相B是甲酸—乙酸銨的乙腈溶液和水的體積分數為95：5的混合溶液。

在一個優選的實施例中，流動相A中，水溶液中甲酸體積濃度為0.025％；流動相B中，乙腈溶液中甲酸體積濃度為0.025％。

在一個優選的實施例中，流動相A中，水溶液中乙酸銨濃度為1mM；流動相B中，乙腈溶液中乙酸銨濃度為1mM。