[發明專利]超聲酯交換法檢測食用油中3-氯丙醇酯含量

在審

• 申請號: 201910143876.4
• 申請日: 2019-02-26
• 公開（公告）號: CN109856281A
• 公開（公告）日: 2019-06-07
• 發明（設計）人: 李利君;李加辛;馬靖軒
• 申請（專利權）人: 河南工業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種超聲酯交換法檢測食用油中3?氯丙醇酯含量方法，包括如下步驟：步驟1超聲條件下發生酯交換反應，將3?氯丙醇酯解離成游離的3?氯丙醇；步驟2：將3?氯丙醇與脂肪酸甲酯分離；步驟3：將步驟2中得到的3?氯丙醇與苯基硼酸（PBA）反應，得到3?氯丙醇的苯硼酸酯衍生物。步驟4：用氣質聯用儀（GC?MS）測定3?氯丙醇的苯硼酸酯衍生物含量，進而確定油脂中3?氯丙醇酯含量。本方法的優點是較于之前的直接和間接法檢測3?氯丙醇酯的方法來說，檢測成本低，檢測快速準確，且具有較高的靈敏性和準確性，為檢測3?氯丙醇酯提供了一種十分可靠的方法。

技術領域

本發明涉及一種食用油中3-氯丙醇酯含量的檢測方法。

背景技術

脂肪酸3-氯丙醇酯是3-氯丙醇與高級脂肪酸結合而形成的一類新的食品污染物。近期研究發現3-氯丙醇脂肪酸酯在胃腸道中可以完全的水解為3-氯丙醇。3-氯丙醇具有腎臟毒性，生殖毒性，免疫抑制和潛在致癌性等作用,FAO/WHO建議其最高日允許攝取量(PMTDI)為2ug/kg。2016年，歐洲食品安全局更保守的指出自由的和酯化的3-氯丙醇日攝取量(TDI)為0.8ug/kg。

3-氯丙醇酯的檢測方法分為直接法和間接法。直接法不破壞3-氯丙醇酯結構的基礎上，直接測定其含量的方法。直接法一方面由于商品化氯丙醇酯標準品有限，無法實現氯丙醇酯的全譜解析，另一方面所需儀器比較精密昂貴，限制了一般實驗室食用，影響了其推廣。間接法即將3-氯丙醇酯進行一系列的衍生化反應，生成易于色譜儀器進行定量分析的物質，進而間接測定其含量。

目前測定3-氯丙醇酯含量較穩定的方法為酸催化酯交換--苯硼酸衍生化的間接測定法，主要步驟為將3-氯丙醇酯在酸催化的作用下搖床反應16h，將脂肪酸3-氯丙醇酯解離成游離的3-氯丙醇，加入鹽析試劑，萃取法提取游離3-氯丙醇，3-氯丙醇與苯硼酸衍生化反應生成相應的苯硼酸酯，進氣質聯用儀(GC-MS)測定，進而確定3-氯丙醇酯的總量。

發明內容

本發明提供一種超聲酯交換法檢測食用油中3-氯丙醇酯含量方法，該方法較之前的直接和間接法檢測3-氯丙醇酯的方法來說，檢測成本低，檢測快速準確，且具有較高的靈敏性和準確性。

該發明包括以下步驟：

步驟一：以H2SO4/甲醇溶液(1.8％,v/v)催化，超聲條件下發生酯交換反應，將3-氯丙醇酯解離成游離的3-氯丙醇。反應如圖1

步驟二：用20％硫酸鈉溶液鹽析，正己烷萃取的方式，將3-氯丙醇與脂肪酸甲酯分離。

步驟三：將步驟二中得到的3-氯丙醇與苯基硼酸(PBA)的乙醚溶液反應，得到3-氯丙醇的苯硼酸酯衍生物。反應如圖2

步驟四：用氣質聯用儀(GC-MS)測定3-氯丙醇的苯硼酸酯衍生物含量，進而確定油脂中3-氯丙醇酯含量。

附圖說明

圖1：步驟一中，脂肪酸3-氯丙醇酯在酸催化下的酯交換反應；

圖2：步驟三中，3-氯丙醇與苯硼酸的衍生化反應；

圖3：3-氯丙醇酯含量與質譜響應比的標準曲線。

具體實施方式

實施例1：

酸催化酯交換反應時間的優化

水解：量取1μg/mL的3-氯丙醇棕櫚酸酯標準溶液100μL和10μg/mL的氘代3-氯丙醇棕櫚酸酯內標溶液50μL于試管中，加入100μL甲基叔丁基醚，渦旋混勻，加入1.8ml H2SO4/甲醇溶液(1.8％)，渦旋混勻后50℃下超聲分別1h、2h、3h、4h、5h、6h。超聲結束后加入500ulNaHCO3飽和溶液終止水解，渦旋混勻，氮吹(35～40℃)到1mL，待凈化。