[發明專利]一種檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP引物組及試劑盒

在審

• 申請號: 201910106450.1
• 申請日: 2019-02-02
• 公開（公告）號: CN109628622A
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發明（設計）人: 李軍;馮世文;李常挺;潘艷;彭昊;陳忠偉;吳翠蘭;鐘舒紅;馬春霞;胡帥;賀會利;陶立;謝永平
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 李彥孚;何承鑫

1.一種檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP引物組，其特征在于，所述的LAMP引物組為SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列；

所述SEQ ID NO：1、 SEQ ID NO：2為內引物FIP和BIP；

所述SEQ ID NO：3、 SEQ ID NO：4為外引物F3和B3；

所述SEQ ID NO：5為環引物LF。

2.根據權利要求1所述的檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP引物組，其特征在于，所述的LAMP引物組具有與SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列中同源性為60%以上的序列。

3.根據權利要求1所述的檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP引物組，其特征在于，所述的LAMP引物組具有與SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列中進行雜交的序列。

4.根據權利要求1所述的檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP引物組，其特征在于，所述的LAMP引物組具有與SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列進行轉錄的序列。

5.根據權利要求1所述的檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP引物組，其特征在于，所述的LAMP引物組具有與SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列進行優化截短的序列。

6.一種如權利要求1所述的檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP試劑盒，其特征在于，包括LAMP引物組、2×反應緩沖液、Bst DNA聚合酶、超純水和多殺性巴氏桿菌DNA模板 。

7.根據權利要求6所述的檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP試劑盒，其特征在于，所述2×反應緩沖液由Buffer、dNTPs、Mg²⁺組成。

8.根據權利要求6所述的檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP試劑盒，其特征在于，所述LAMP試劑盒的反應體系為25 μL：其中包括12.5 μL的2×反應緩沖液，1 μL的Bst DNA聚合酶，5 pmol的SEQ ID NO：1，5 pmol的SEQ ID NO：2，40 pmol的SEQ ID NO：3，40 pmol的SEQ ID NO：4，25 pmol的SEQ ID NO：5，2 μL的多殺性巴氏桿菌DNA模板，再加入超純水補足25 μL。

9.根據權利要求6所述的檢測多殺性巴氏桿菌的實時定量LAMP試劑盒，其特征在于，所述LAMP試劑盒的應程序為：63℃恒溫保持60 min，擴增結束后85℃滅活5 min。