[發(fā)明專利]血液中檢測lnc_ENST00000319426.3在診斷胃癌分期中的應用

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• 申請日: 2019-01-31
• 公開（公告）號: CN109652553A
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發(fā)明（設計）人: 康寧;朱桂芳;曹秀峰
• 申請（專利權）人: 江蘇萬成生物醫(yī)學研究院有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 32206
• 代理人: 葉涓涓

本發(fā)明公開了一種血液中檢測lnc_ENST00000319426.3在診斷胃癌分期中的應用，lnc_ENST00000319426.3分子標志物的核苷酸序列為SEQ ID NO.1。涉及l(fā)nc_ENST00000319426.3的發(fā)現(xiàn)、檢測、應用，設計并合成出特異性用于實時定量PCR的檢測引物。血液中的lnc_ENST00000319426.3可作為胃癌患者的血漿標志物。本發(fā)明提出了lnc_ENST00000319426.3的用途，lnc_ENST00000319426.3在GC患者和正常人血液樣本中表達量存在差異，并且與分期相關，因此lnc_ENST00000319426.3具有成為GC生物標志物的應用前景。

技術領域

本發(fā)明涉及腫瘤分子生物學領域，具體為一種血液中檢測lnc_ENST00000319426.3在診斷胃癌分期中的應用。

背景技術

目前，胃癌仍然在全球癌癥相關死亡排名第三位，是社會的主要健康負擔之一。在中國，胃癌是第二大流行癌癥，也是導致癌癥死亡的第二大原因，2015年估計有679,100新病例和498,000人死亡。雖然手術技術和聯(lián)合化療方案有所進步，但在大多數(shù)國家，胃癌的5年總生存仍低于30％，因為缺乏胃癌早期診斷標志物。因此，不斷探索GC的發(fā)生發(fā)展機制，尋找新的早診、預后以及治療相關的分子標志物，是提高GC患者療效及改善預后的重要手段。

非編碼RNA(noncoding RNA，ncRNA)之前一直被認為是轉(zhuǎn)錄過程中產(chǎn)生的“噪音”，隨著現(xiàn)代生物學技術的發(fā)展，ncRNA得到越來越清晰的認識。其中，lncRNA是一類長度超過200個核苷酸的功能性RNA分子，通常缺失開放性閱讀框，從而缺乏編碼蛋白的能力。lncRNA參與多個層面的基因調(diào)控，包括表觀遺傳水平調(diào)控、轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控及轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控。近期，國內(nèi)關于腫瘤lncRNA表達譜的研究十分火熱，包括高通量芯片篩選和RNA深度測序，以及qRT-PCR在內(nèi)的實驗技術均已發(fā)展的十分成熟，發(fā)現(xiàn)lncRNA與人類疾病密切相關。在同一種疾病中可發(fā)現(xiàn)不同的lncRNA差異表達譜，同時也發(fā)現(xiàn)同一lncRNA可在多種腫瘤疾病中檢測到并在腫瘤進程中發(fā)揮不同的生物學作用，如lncRNA-UCA1在肺癌、乳腺癌、膀胱癌、胃癌、骨肉瘤等常見惡性腫瘤中。LncRNA具有相對穩(wěn)定二級結構，且可分泌到體液中，已被證實在人血漿、尿液和唾液甚至是胃液等體液中檢測到lncRNA。基于此，研究人員已在此前的研究中探索了lncRNA在體液中(包括血漿中)作為腫瘤生物標記物的潛在作用。例如，在前列腺癌患者血漿中，MALAT1[11]表達水平明顯高于非前列腺癌患者，其敏感性和特異性分別為58.6％和84.8％，有望成為前列腺癌診斷和分期的檢測指標。在尿液中也有檢測到PCA3的表達，可為提高前列腺癌的早期診斷率提供依據(jù)。

目前ESCC尚沒有血漿腫瘤標志物來評估病情，內(nèi)鏡是金標準。通過檢測患者血液中CEA/CA199/CA153等腫瘤指標來評估患者的病情，但是創(chuàng)傷大，患者不易接受。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明公開了一種血液中檢測lnc_ENST00000319426.3在診斷胃癌分期中的應用，測外周血中的lncRNA分子，這一檢查方法容易被受檢者接受，更可成為GC患者的早診、病情進展的判斷以及預后評估的有效手段。我們采用基因芯片技術檢測GC患者(早期和晚期)及正常人外周中l(wèi)ncRNA的表達譜，并且再將不同分期(早期vs晚期)的GC患者外周血中的lncRNA作比較，得到在GC發(fā)生發(fā)展的不同階段的lncRNA表達譜，篩選出具有研究價值的與臨床分期相關的lncRNA，擴大樣本驗證其在GC患者血漿、組織的表達水平是否一致，為GC的診斷和治療提供新的選擇。

為了達到以上目的，本發(fā)明供如下技術方案：

本發(fā)明公開了一種血液中檢測lnc_ENST00000319426.3在診斷胃癌分期中的應用，所述lnc_ENST00000319426.3分子標志物的核苷酸序列為SEQ ID NO.1。

在本發(fā)明中，用于胃癌診斷的試劑為實時定量PCR試劑盒。