[發明專利]一種光交聯型去細胞瓣膜及其制備方法和其應用

在審

• 申請號: 201910040192.1
• 申請日: 2019-01-16
• 公開（公告）號: CN109821069A
• 公開（公告）日: 2019-05-31
• 發明（設計）人: 董念國;劉春耕;喬韡華;白鵬;史嘉瑋;吳鈺周
• 申請（專利權）人: 華中科技大學同濟醫學院附屬協和醫院
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/50
• 代理公司: 武漢泰山北斗專利代理事務所(特殊普通合伙) 42250
• 代理人: 程千慧

本發明涉及一種光交聯型去細胞瓣膜及其制備方法和其應用。上述制備方法包括：步驟一、將去細胞處理后的瓣膜置于核黃素溶液中并輕柔搖晃以使核黃素充分擴散進入去細胞基質中；步驟二、將經步驟一處理的瓣膜從核黃素溶液中取出，再以紫外線照射交聯后清洗去除瓣膜中殘余核黃素，即可獲得一種光交聯型去細胞瓣膜。本發明中創新性的將核黃素及光交聯用于處理并增強去細胞基質瓣膜的力學性能，且結果顯示該處理能顯著提高瓣膜的楊氏模量，并能減緩其體內降解速度。

技術領域

本發明涉及一種支架材料，尤其涉及一種光交聯型去細胞瓣膜及其制備方法和其應用。

背景技術

去細胞基質是應用不同去細胞方法對組織進行去細胞處理所獲得的，在去細胞過程中盡可能地保留天然組織原有形態及生物力學性能，去細胞基質組織作為仿生支架材料，常用于組織工程與再生醫學中。

但是由于組織中的彈性蛋白、蛋白聚糖等細胞外基質仍存在不同程度的損傷、丟失，致使去細胞處理后組織存在力學性能下降、易降解等缺點。而力學性能下降使得去細胞處理后的瓣膜在植入人體后易發生穿孔、關閉不全；而降解過快可能使植入組織因降解速度遠快于人體組織再生而導致植入物早期衰敗。

由于去細胞基質的主要成分為膠原纖維，膠原纖維的結構及空間排列影響組織的力學性能，因此促進膠原交聯可增強其力學性能及穩定性。促進膠原交聯的方法有多種，在生理環境中主要是通過相應酶催化交聯，如賴氨酰氧化酶，從而使膠原獲得其自然的硬度、穩定性以及組織特異的彈性；非酶促法包括用化學試劑、光氧化等，傳統的戊二醇交聯途徑雖然能顯著提高去細胞基質的力學性能，但存在易鈣化、易衰敗且有細胞毒性等問題。導致細胞不能在戊二醛交聯后的組織上生長，難以發生組織重塑。

因此，需要一種新的不僅能增強去細胞處理后組織的力學性能而且能減緩其體內降解速度的制備方法。

發明內容

針對上述問題，現提供一種旨在解決上述問題的光交聯型去細胞瓣膜及其制備方法和其應用。

具體技術方案如下：

一種光交聯型去細胞瓣膜的制備方法，具有這樣的特征，包括如下步驟：

步驟一、將去細胞處理后的瓣膜置于核黃素溶液中并輕柔搖晃以使核黃素充分擴散進入去細胞基質中；

步驟二、將經步驟一處理的瓣膜從核黃素溶液中取出，再以紫外線照射交聯后清洗去除瓣膜中殘余核黃素，即可獲得一種光交聯型去細胞瓣膜。

上述的制備方法，還具有這樣的特征，步驟一核黃素溶液中核黃素的質量濃度為0.04％-1％。

上述的制備方法，還具有這樣的特征，步驟二中紫外線照射交聯時間為5-120min，紫外光照射光強為1-5mw/cm²。

上述的制備方法，還具有這樣的特征，步驟二中清洗方法為：將經紫外線照射交聯后的瓣膜于搖床上用無菌PBS清洗24小時，每6小時換液1次。

上述的制備方法，還具有這樣的特征，瓣膜選自豬主動脈瓣膜或牛心包。

本發明中去細胞處理的方法采用本發明人在先申請的申請號為CN201610921956.4、發明名稱為“一種用于去除組織細胞的試劑盒和去細胞方法”的專利中提供的方法進行處理。

本發明的第二個方面是提供一種根據上述制備方法制備獲得的光交聯型去細胞瓣膜。

本發明的第三個方面是提供一種上述光交聯型去細胞瓣膜在組織工程及再生醫學中的應用。

本發明中提供的光交聯型去細胞瓣膜可應用于生物支架的制備。

上述方案的有益效果是：