[發明專利]釀酒酵母菌中染色質重塑因子基因在提高發酵酒精產率的應用

在審

• 申請號: 201910011798.2
• 申請日: 2019-01-07
• 公開（公告）號: CN109666705A
• 公開（公告）日: 2019-04-23
• 發明（設計）人: 蔣伶活
• 申請（專利權）人: 山東理工大學
• 主分類號: C12P7/06
• 分類號: C12P7/06;C12R1/865
• 代理公司: 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531
• 代理人: 李宏偉

本發明公開了一種釀酒酵母菌中染色質重塑因子基因在提高發酵酒精產率的應用。染色質重塑因子基因包括SPT10,SWI3,NGG1,UME6和RSC1基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1?5所示。本發明為提高酒精發酵的生產效率提供了新的方法，為構建高產酒精的優良釀酒酵母工程菌株提供了重要的信息。

技術領域

本發明屬于生物能源技術開發技術領域，具體地說，涉及一種釀酒酵母菌中染色質重塑因子基因在提高發酵酒精產率的應用。

背景技術

微生物發酵法生產燃料酒精是當前研究的熱點，釀酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)是目前最為理想的酒精發酵生產菌株。目前國內外利用玉米淀粉作為原料，通過釀酒酵母菌發酵生產燃料酒精的技術已經非常成熟。通過傳統的菌種選育手段(如自然篩選、誘變育種)來提高菌株的酒精發酵產量，已經基本到了極限。近年來，隨著分子生物學和組學技術的快速發展，為大規模研究釀酒酵母基因和酒精發酵的關系提供了條件。通過染色質重塑，可以同時改變許多基因的表達水平，從而獲得新的性狀，是通過單個基因的改變所不能比擬的。

在現有技術中還沒有通過染色質重塑方法來提高釀酒酵母酒精產率的報道。

發明內容

有鑒于此，本發明針對上述的問題，提供了一種釀酒酵母菌中染色質重塑因子基因在提高發酵酒精產率的應用。

為了解決上述技術問題，本發明公開了一種釀酒酵母菌中染色質重塑因子基因在提高發酵酒精產率的應用。

可選地，包括以下步驟：在YPD平板上劃線活化含有染色質重塑因子基因的釀酒酵母菌，30℃培養2天；取一個單菌落接種30mL的YPD液體培養基，30℃，220r/min搖床培養16小時以上至飽和；按10％的比例把種子菌液接種到100mL的發酵培養基中，30℃，220r/min進行搖床培養8小時，然后轉為靜置培養發酵。

可選地，所述的YPD液體培養基含葡萄糖2％，酵母提取物1％，蛋白胨2％，去離子水溶解，pH7.0，通過高壓滅菌，滅菌條件為115℃，20min。

可選地，所述的發酵培養基中各種成分的含量(g/L)為：葡萄糖100，硫酸銨7.5，磷酸二氫鉀3.5，七水硫酸鎂0.75，酵母提取物0.2，組氨酸0.02，尿嘧啶0.02，亮氨酸0.1，pH7.0，通過高壓滅菌，滅菌條件為115℃，20min。

可選地，所述的染色質重塑因子基因，其特征在于，包括SPT10,SWI3,NGG1,UME6和RSC1基因。

可選地，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-5所示。

與現有技術相比，本發明可以獲得包括以下技術效果：

1)本發明通過功能基因組學技術篩選，發現5個染色質重塑因子基因(SPT10,SWI3,NGG1,UME6或者RSC1)的缺失，能夠提高釀酒酵母菌發酵的酒精得率。

2)本發明為提高酒精發酵的生產效率提供了新的方法，為構建高產酒精的優良釀酒酵母工程菌株提供了重要的信息。

當然，實施本發明的任一產品并不一定需要同時達到以上所述的所有技術效果。

附圖說明

此處所說明的附圖用來提供對本發明的進一步理解，構成本發明的一部分，本發明的示意性實施例及其說明用于解釋本發明，并不構成對本發明的不當限定。在附圖中：

圖1是本發明五個染色質重塑因子基因(SPT10,SWI3,NGG1,UME6或者RSC1)的缺失菌株和野生型釀酒酵母菌株(WT)在發酵培養基中培養32小時(32h)和52小時(52h)后的產率(酒精產量/菌體干重比)；其中，*號表示每個基因缺失菌株和野生型菌株分別在32小時和52小時時間點的比較存在顯著性差異。

具體實施方式