[發明專利]一種用于犬的三聯IgG抗體檢測的蛋白芯片及其應用在審
| 申請號: | 201910008010.2 | 申請日: | 2019-01-04 |
| 公開(公告)號: | CN109613267A | 公開(公告)日: | 2019-04-12 |
| 發明(設計)人: | 趙波 | 申請(專利權)人: | 南京秋浦生物科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/68 | 分類號: | G01N33/68 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 211800 江蘇省*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 蛋白芯片 三聯 犬傳染性肝炎 犬瘟熱病毒 犬細小病毒 檢測 預處理 生物技術領域 診斷試劑盒 抗原溶液 聯合檢測 芯片技術 應用蛋白 低成本 有效地 載玻片 點樣 制備 應用 封閉 | ||
本發明涉及生物技術領域,尤其是涉及一種用于犬的三聯IgG抗體檢測的蛋白芯片和應用;所述犬的三聯IgG抗體為犬傳染性肝炎、犬細小病毒和犬瘟熱病毒,所述蛋白芯片的制備方法包括以下步驟:(1)載玻片預處理;(2)抗原溶液點樣;(3)封閉工藝,制得所述蛋白芯片;本發明的蛋白芯片用于檢測犬傳染性肝炎(ICH)/犬細小病毒(CPV)/犬瘟熱病毒(CDV)三聯IgG抗體,應用蛋白芯片技術實現聯合檢測可以有效地提高檢測效率,降低檢測成本;同時包含ICH、CPV和CDV三個指標的蛋白芯片診斷試劑盒,具有快速,高效,低成本等優點。
技術領域
本發明涉及生物技術領域,尤其是涉及一種用于犬的三聯IgG抗體檢測的蛋白芯片和應用。
背景技術
現在家庭飼養的寵物越來越多,注重寵物的健康、犬ICH、CPV、CDV指標的重要性。市面上已有的各類試劑盒基于Elisa和膠體金,靈敏度低,線性范圍窄,定性不定量。蛋白芯片基于化學發光,靈敏度高,線性范圍寬,定量,聯檢通量高,成本底。
發明內容
針對現有技術存在的上述問題,本發明提供了一種用于犬的三聯IgG抗體檢測的蛋白芯片,本發明蛋白芯片用于檢測貓和貓感染標志物,應用本公司獨創的蛋白芯片技術實現聯合檢測可以有效地提高檢測效率,降低檢測成本;本發明人開發了犬傳染性肝炎(ICH)/犬細小病毒(CPV)/犬瘟熱病毒(CDV)三聯IgG抗體檢測的蛋白芯片診斷試劑盒,具有快速,高效,低成本等優點;本發明的另一個目的是:提供一種用于犬的三聯IgG抗體檢測的蛋白芯片的應用。
為解決上述技術問題,本發明采用的技術方案如下:
一種用于犬的三聯IgG抗體檢測的蛋白芯片,所述犬的三聯IgG抗體為犬傳染性肝炎、犬細小病毒和犬瘟熱病毒,所述蛋白芯片的制備方法包括以下步驟:
(1)載玻片預處理;
(2)抗原溶液點樣;
(3)封閉工藝,制得所述蛋白芯片。
進一步的,所述步驟(1)中載玻片預處理方法包括以下步驟:
①將載玻片置于含有H2SO4的玻片預處理液中浸泡16~24h,之后采用純化水清洗2~8次;
②將載玻片置于質量濃度為0.05~1%的硅烷水溶液中浸泡40~80min;
③將浸泡好的載玻片放入烘箱中,于150~210℃條件下烘烤0.5~1h。
進一步的,所述步驟(2)中所述抗體溶液包括犬ICH、CPV、CDV抗原溶液。
進一步的,步驟(2)中所述點樣的方法為機器自動化點樣。
進一步的,所述步驟(3)中所述封閉過程為:將點樣好的載玻片沒入封閉液中2~8h,之后取出載玻片,并離心去除殘余封閉液,制得所述蛋白芯片。
進一步的,所述封閉液為含有封閉蛋白的緩沖溶液;所述封閉蛋白為牛血清白蛋白或酪蛋白;所述緩沖液為PBS緩沖液、Tris緩沖液、HEPS緩沖液、MOPS緩沖液中的一種或多種。
進一步的,所述緩沖溶液中封閉蛋白的濃度為0.5%-5%。
一種用于犬的三聯IgG抗體檢測的蛋白芯片的應用,將所述蛋白芯片制成試劑盒。
進一步的,所述試劑盒還包括標記有HRP酶的鼠抗貓IgG溶液、對HRP酶敏感的化學發光底物。
采用本發明的技術方案的有益效果是:
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