[發明專利]一種鷓鴣茶紅、綠鮮葉揮發性成分的GC-MS分析方法

在審

• 申請號: 201910005999.1
• 申請日: 2019-01-04
• 公開（公告）號: CN109541073A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 李娟玲;覃少昌;張彩鳳;陳輝;李碧英;嚴武平;吳淑敏;孫迪
• 申請（專利權）人: 海南大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;A61K36/47;A61P11/10;A61P11/14;A61P25/24;A61P25/22;A61P29/00;A61P35/00;A61P33/00;A61P31/00
• 代理公司: 重慶市信立達專利代理事務所(普通合伙) 50230
• 代理人: 包曉靜

本發明屬于植物學分析技術領域，公開了一種鷓鴣茶紅、綠鮮葉揮發性成分的GC?MS分析方法；PDMS/DVB固相微萃取頭老化：每次進樣前萃取頭均250℃預先老化15min；氣相色譜條件：色譜柱Agilent HP?5MS，載氣為高純度氦氣，進樣口溫度250℃，不分流，程序升溫：初始溫度40℃，保持4min，以5℃/min升至80℃，然后以10℃/min升至260℃，保持10min，流速1mL/min；質譜條件：離子源溫度：230℃，四級桿150℃；電離電壓70eV；掃描范圍：35.0?800.0aum；將PDMS/DVB 65μm固相微萃取頭插入進樣口，按氣相色譜和質譜條件進行儀器分析，直到色譜圖沒有峰出現為止。

技術領域

本發明屬于植物學分析技術領域，尤其涉及一種鷓鴣茶紅、綠鮮葉揮發性成分的GC-MS分析方法。

背景技術

目前，業內常用的現有技術是這樣的：鷓鴣茶又稱山苦茶、五月茶等，為大戟科野桐屬常綠灌木或小喬木，株高2～12m，植物葉片干燥后會散發出濃郁的零陵香氣。海南鷓鴣茶具有深厚的文化底蘊、獨特的地理優勢、老少皆宜的飲用特色和獨一無二的功能特征，能祛痰、止咳、驅風、驅蟲、鎮痛、抗抑郁、抗菌、抗焦慮、抗腫瘤等功能，受歷代文人墨客厚愛，并有茶品中的“靈芝草”之美譽。海南鷓鴣茶遍布海南島每個縣市，尤以樂東、文昌、萬寧、陵水、三亞、白沙、定安、東方、瓊中、保亭和昌江等縣市居多。頂空固相微萃取已經被廣泛應用于各種樣品揮發性成分的一種有效提取技術，跟過去使用較多的同時蒸餾萃取(SDE)相比，具有簡單、可靠、靈敏度高、重現性好，不需要任何有機溶劑、自動進樣等優點。尤其是頂空固相微萃取(HS-SPME)，采用纖維振動方式，從參數設置到樣品控制都由軟件全自動控制，減少了人為誤差，避免了萃取固相受到某些樣品基質中高分子物質和不揮發性物質的污染，縮短了平衡時間，提高了精確度，而且可以連續測定大量樣品，為精準分析不同葉色、不同居群、不同采收時間和不同采收部位等揮發性成分具有重要意義。因而，選用HS-SPME/GC-MS是一種比較理想的茶葉揮發性成分分析技術。

鷓鴣茶葉片具有祛痰、止咳、驅風、驅蟲、鎮痛、抗抑郁、抗菌、抗焦慮、抗腫瘤等功能，海南本地及其華僑世世代代用鷓鴣茶葉片茶藥兩用，然而，不同葉色鷓鴣茶揮發性功能一直是爭論的焦點。

綜上所述，現有技術存在的問題是：選擇65μm PDMS/DVB萃取頭進行萃取老化時間過長,對萃取頭造成損傷且增加實驗時間，過短或者未進行老化，則會留有上一次實驗殘留物，影響實驗準確性，使得實驗不理想；萃取時間過長會導致樣品中一些微量化合物的揮發性成分被覆蓋，萃取時間過短則會使樣品未充分萃取，導致待測樣品成分缺失。通過多次進行萃取，找到其較佳萃取時間，得到相對較好的實驗數據。

解決上述技術問題的難度和意義：

(1)根據文獻參考，選擇65μm PDMS/DVB萃取頭進行萃取，其適用于揮發性物質、胺類、硝基芳香類化合物的萃取，且能得到更多的成分。老化時間過長會對萃取頭造成損傷且增加實驗時間，過短或者未進行老化，則會留有上一次實驗殘留物，影響實驗準確性，使得實驗不理想。

(2)萃取時間過長會導致樣品中一些微量化合物的揮發性成分被覆蓋，萃取時間過短則會使樣品未充分萃取，導致待測樣品成分缺失。通過多次進行萃取，找到其較佳萃取時間，得到相對較好的實驗數據。

(3)色譜質譜條件的設定：載氣及流速、載氣及流速、柱溫的選擇、柱溫的選擇、色譜柱長和內徑的選擇、色譜柱長和內徑的選擇等設定，都會影響實驗的準確性。通過反復實驗得出其設定的較佳條件，以減小實驗誤差。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供了一種鷓鴣茶紅、綠鮮葉揮發性成分的GC-MS分析方法。

本發明是這樣實現的，一種鷓鴣茶紅、綠鮮葉揮發性成分的GC-MS分析方法，所述鷓鴣茶紅、綠鮮葉揮發性成分的GC-MS分析方法包括以下步驟：