[發(fā)明專(zhuān)利]一種JMH血型抗原芯片及其在紅細(xì)胞意外抗體檢測(cè)中的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910003164.2
• 申請(qǐng)日: 2019-01-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109725144A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于曉波;汪德清;楊璐
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京蛋白質(zhì)組研究中心
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/53
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/53;G01N33/531
• 代理公司: 北京領(lǐng)科知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

1.一種血型抗原芯片，包括純化血型抗原和載體，所述的純化血型抗原包被至所述的載體上；所述的載體為微球，所述的微球選自二氧化硅微球、聚苯乙烯微球、磁性微球和生物大分子聚合物微球中的一種或兩種以上的組合。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血型抗原芯片，其特征在于，所述純化血型抗原為JMH。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血型抗原芯片，其特征在于，所述的純化血型抗原包被至載體的量為1-200μg/1.25×10⁷個(gè)微球。

4.一種權(quán)利要求1-3任一所述的血型抗原芯片的制備方法，包括如下步驟：

(1)微球的預(yù)處理：將微球超聲重懸；

(2)微球的活化：將微球依次加入N-羥基硫代琥珀酰亞胺、碳二亞胺活化；

(3)向微球溶液中加入純化血型抗原進(jìn)行偶聯(lián)，所述的純化血型抗原能夠結(jié)合紅細(xì)胞意外抗體。

5.一種權(quán)利要求1-3任一所述的血型抗原芯片在如下用途中的應(yīng)用：(1)紅細(xì)胞意外抗體的篩查及鑒定；(2)紅細(xì)胞意外抗體的定量檢測(cè)；(3)輸血配型。

6.一種用權(quán)利要求1-3任一所述的血型抗原芯片進(jìn)行血型抗體的鑒定或檢測(cè)方法，包括：

(1)將純化血型抗原包被至載體，所述的純化血型抗原能夠結(jié)合紅細(xì)胞意外抗體；

(2)使檢測(cè)樣品與包被至載體的抗原孵育；

(3)加入標(biāo)記有標(biāo)記物的二抗；

(4)針對(duì)標(biāo)記物進(jìn)行信號(hào)檢測(cè)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述的檢測(cè)樣品為全血、血清、血漿或抗體，所述檢測(cè)樣品稀釋后再與包被至載體的抗原接觸，稀釋倍數(shù)為25-200倍。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中檢測(cè)樣品與包被至載體的抗原孵育的時(shí)間為15-60min。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述的標(biāo)記有標(biāo)記物的二抗選自標(biāo)記有熒光素或酶的蛋白或抗體及其偶聯(lián)物；所述蛋白或抗體及其偶聯(lián)物選自親和素、鏈霉親和素、地高辛抗體、組氨酸抗體、含Ni親和分子、熒光分子抗體；所述的熒光素選自花青素Cy系列熒光素、Alexa Fluor系列熒光素或異硫氰酸熒光素；所述的酶為堿性磷酸酶或過(guò)氧化物酶；所述二抗的加入濃度為1-8ug/ml。

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述的信號(hào)檢測(cè)包括熒光法檢測(cè)、顯色法檢測(cè)、電化學(xué)檢測(cè)、力學(xué)檢測(cè)。