[發明專利]李斯特菌噬菌體組合物及其應用

有效

• 申請號: 201910001297.6
• 申請日: 2019-01-02
• 公開（公告）號: CN109735506B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: 張輝;王冉;包紅朵;吳立婷;龐茂達;周艷
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A01N63/40;A01P1/00;C12R1/92
• 代理公司: 北京德崇智捷知識產權代理有限公司 11467
• 代理人: 王斌

本發明屬于生物技術領域，一種噬菌體組合物，其特征在于：所述的組合物包括：單核細胞增生性李斯特菌噬菌體CCTCC NO：M 2010003、單核細胞增生性李斯特噬菌體CCTCC NO：M 2018644及單核細胞增生性李斯特噬菌體CCTCC NO：M 2018645；該噬菌體組合物，其作用宿主范圍更廣，效率更高，在作用3h即可有效抑制宿主生長，其相對單一噬菌體在實際環境中應用效果更佳。

技術領域

本發明涉及李斯特菌噬菌體菌株及其混合物作為食品添加成分在固態及液態食品中的應用，尤其是能夠特異性裂解食品中污染的多種李斯特菌的噬菌體混合物的應用。屬于生物工程領域。

背景技術

李斯特菌(Listeria)是一種能夠引起動物和人李斯特菌病的革蘭氏陽性細菌，其中單核細胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是最重要的食源性人獸共患病原，感染后主要表現為胃腸炎、敗血癥、腦膜腦炎和流產等，死亡率高達25-30％。在自然界中，Lm通常存在于土壤、河水、植物、屠宰場廢棄物及動物源食品中(肉、奶及其制品、海產品等)，且在低溫環境中仍可生長繁殖(如2～8℃)，是冷藏食品以及即食(Ready-To-Eat,RTE)食品中威脅人類健康的重要病原菌之一。國內主要城市食品污染調查研究顯示，北京8類食品中，Lm平均檢出率為21.5％；河南省熟肉制品中檢出率為16.98％；威海市12類產品中檢出率達9.09％。在國外，美國和加拿大曾爆發過6起重大的李斯特菌病，而這都與食用了污染李斯特菌的食品有關。

噬菌體是一類細菌依賴性的病毒，又稱細菌病毒。具有裂解性的噬菌體能夠感染細菌并在細菌體內快速增殖，使之裂解。Lm噬菌體可以特異性感染并裂解Lm，因而具有殺菌作用。在食品尤其是即食性食品中，噬菌體能夠作為加工助劑或添加成分來控制Lm污染，減少化學殺菌防腐劑的使用，保障食品安全、綠色，具有良好的開發和應用價值。

噬菌體能夠有效抑制單核細胞增生性李斯特菌，但由于其特異性，從而在實際應用中出現抑制效率不完全等特點，因此，通過李斯特菌噬菌體作用宿主范圍的差異進行組合，能夠有效提高噬菌體的裂菌效率，從而解決實際應用過程中抑制不完全等現狀，有效控制食源性單核細胞增生性李斯特菌的污染。

發明內容

本發明的目的在于：開發對李斯特菌具有強裂解作用的噬菌體制劑，該制劑可以單獨或復配使用，能夠特異性的滅活多種食源性李斯特菌，為目前防控食品中李斯特菌污染提供一種安全、無毒副作用的噬菌體產品來源。

本發明的目的是這樣實現的：一種噬菌體組合物，其特征在于：所述的組合物包括：單核細胞增生性李斯特菌噬菌體CCTCC NO：M 2010003、單核細胞增生性李斯特噬菌體CCTCC NO：M 2018644及單核細胞增生性李斯特噬菌體CCTCC NO：M 2018645，對單核細胞增生性李斯特菌具有實質性裂解作用。

所述的一種噬菌體組合物，其特征在于所述的單核細胞增生性李斯特菌噬菌體CCTCC NO：M 2010003、單核細胞增生性李斯特噬菌體CCTCC NO：M 2018644)和單核細胞增生性李斯特噬菌體CCTCC NO：M 2018645，按體積比1:1:1混合而成。

所述的噬菌體組合物在制備作為李斯特菌抑制劑中的應用。

所述噬菌體組合物的培養物作為李斯特菌抑制劑中的應用。

所述的應用指的是將噬菌體組合物制成噴灑液或淋洗液，用于對食品、食品生產環境或生產器具的噴灑或消殺，防止食品加工過程中造成的李斯特菌污染。

所述的食品，由肉類，或蛋類，或奶制品，或糧食，或蔬菜，或它們之間的組合加工的固體或液體類食品。

將純化的噬菌體組合物或噬菌體的培養物與賦形劑復配后作為李斯特菌的抑制劑的應用。

所述的賦形劑為制藥領域普遍使用的緩沖液、金屬離子、表面活性劑、明膠、海藻酸鹽。