[發明專利]用于核酸合成的微流控芯片

有效

• 申請號: 201880068740.5
• 申請日: 2018-10-08
• 公開（公告）號: CN111246936B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: 孫寶策;王勇;黃小羅;陳泰;譚宏東;沈玥;徐訊
• 申請（專利權）人: 深圳華大生命科學研究院
• 主分類號: B01J14/00
• 分類號: B01J14/00;C07H21/02
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 楊棽

1.一種用于合成核酸的微流控芯片，其包括流道層和覆蓋所述流道層的控制層；

所述流道層布置有：

反應室，

與所述反應室的入口連接的一個或多個輸入微通道，

與所述反應室的出口連接的輸出微通道；

所述控制層布置有：

用于控制輸入微通道的流體輸入的至少一個閥門、用于控制進入和/或流出所述反應室的流體流動的至少一個閥門和用于控制輸出微通道的流體輸出的至少一個閥門，

其中，用于控制反應室的閥門在關閉時未完全關閉反應室的入口和/或出口。

2.權利要求1的微流控芯片，其中所述輸出微通道是一個輸出微通道。

3.權利要求1的微流控芯片，其中，所述反應室是多個反應室。

4.權利要求3的微流控芯片，其中，所述多個反應室各自連接至所述一個或多個輸入微通道。

5.權利要求3的微流控芯片，其中，所述多個反應室各自連接至一個輸出微通道。

6.權利要求1-5任一項的微流控芯片，其中輸入微通道的數量為至少8個，至少24個，至少88個，或至少344個。

7.一種用于合成核酸的微流控系統，其包括權利要求1-6中任一項的微流控芯片。

8.權利要求7的微流控系統，其還包括通過經編程的控制程序來實現對閥門的控制。

9.權利要求7的微流控系統，其中，所述微流控系統還包括二進制尋址系統，所述二進制尋址系統控制所述閥門，從而控制進入和/或流出所述反應室的流體流動以及所述輸入微通道和所述輸出微通道中的流體流動。

10.權利要求7-9任一項的微流控系統，其還包括與輸入微通道和/或閥門連接的壓力驅動裝置。

11.權利要求7-9任一項的微流控系統，其還包括與一個或多個微通道連接的一個或多個貯存器。

12.一種使用權利要求1-6任一項的微流控芯片或權利要求7-11任一項的微流控系統的方法，包括將用于核酸合成的試劑通過一個或多個輸入微通道加入到反應室中，允許在反應室中發生核酸合成反應，然后通過輸出微通道從反應室輸出合成的核酸。

13.權利要求12的方法，其中，不同的試劑通過不同的輸入微通道加入到反應室中。

14.一種使用權利要求1-6任一項的微流控芯片或權利要求7-11任一項的微流控系統的方法，其包括：

a)將其上附接有5’保護的寡核苷酸或核苷酸的固相載體通過輸入微通道加入至反應室中，

b)將脫保護劑通過輸入微通道加入至反應室中，以使得固相載體上附接的寡核苷酸或核苷酸的5’去保護，

c)將核苷酸的亞磷酰胺單體通過輸入微通道加入至反應室中，

d)將亞磷酰胺活化劑通過微通道加入至反應室中，并使得核苷酸的亞磷酰胺單體與5’去保護的核苷或寡核苷酸發生偶合，

e)任選地將封端劑通過微通道加入至反應室中，并使得步驟d)中未與亞磷酰胺單體反應的5’去保護的核苷或寡核苷酸封端；

f)將氧化劑通過微通道加入至反應室中，并使得步驟d)中的偶合反應形成的三價磷基團氧化；

g)任選地重復步驟b)至d)一或多次，其中最終步驟是步驟e)或f)，由此合成所需的核酸；和

h)通過輸出微通道輸出反應室中的固相載體。

15.權利要求14的方法，其中，不同的試劑使用不同的輸入微通道。