[發(fā)明專(zhuān)利]用于檢測(cè)生物及化學(xué)物質(zhì)的光學(xué)磁光方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201880038673.2
• 申請(qǐng)日: 2018-05-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110832301B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 瑪麗亞·貝內(nèi)爾梅基·埃雷特比;塞爾吉·加索·波恩斯;路易斯·米克爾·馬丁內(nèi)斯·加西亞
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 務(wù)實(shí)診斷有限公司;塞普梅格系統(tǒng)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N15/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N15/02;B01L3/00;G01N33/543;G01N21/75;G01N21/59;G01N15/00
• 代理公司: 上海翼勝專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 31218
• 代理人: 翟羽

一種用于檢測(cè)一特定樣品中是否存在一生物或化學(xué)物質(zhì)的方法，所述特定樣品與具有多個(gè)官能化磁性顆粒的一懸浮液混合，所述方法包括：提供一光源及檢測(cè)器；通過(guò)施加一恒定的磁場(chǎng)梯度以及大于0.1T的一絕對(duì)數(shù)值來(lái)提供垂直于所述光的傳播方向的一恒定磁力；以及測(cè)量所述顆粒懸浮液的透明度的隨時(shí)間變化值，并且將其相比較于在不存在所述目標(biāo)的生物或化學(xué)物質(zhì)的情況下的磁性顆粒懸浮液的透明度的隨時(shí)間變化值。本發(fā)明的所述方法允許在無(wú)關(guān)于所述發(fā)射的波長(zhǎng)及顆粒的光學(xué)性質(zhì)下監(jiān)測(cè)所述透明度。

背景技術(shù)

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種用于檢測(cè)物質(zhì)(有機(jī)、無(wú)機(jī)或生物)的方法。特別地，本發(fā)明使用一新穎的磁泳技術(shù)(magnetophoresis technique)，其中將一樣品中的多種材料與多個(gè)官能化的磁性顆粒混合，從而監(jiān)測(cè)隨時(shí)間變化的所述多種光學(xué)性質(zhì)的變化值并且將其與在不存在目標(biāo)生物或化學(xué)物質(zhì)的情況下隨時(shí)間變化的所述多種光學(xué)性質(zhì)的變化值進(jìn)行比較。

相關(guān)技術(shù)說(shuō)明：

近年來(lái)，由于涉及免疫學(xué)過(guò)程的臨床診斷方法的特異性及高靈敏度，使得其在臨床診斷中的應(yīng)用越來(lái)越多。在現(xiàn)有的許多非均相(heterogeneous)及均相的免疫學(xué)分析方法(immunological assay methods)中，基于膠乳顆粒凝集的所述均相分析方法(homogeneous assays)繼續(xù)廣泛地被用于生物學(xué)及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，以用于檢測(cè)一液體測(cè)試樣品中的少量的一抗體或抗原。這些分析方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、適用范圍廣、無(wú)危害性以及能在一很短的時(shí)間內(nèi)得到檢測(cè)結(jié)果。所述凝集反應(yīng)涉及微觀載體顆粒(通常具有聚合性質(zhì)，稱(chēng)為乳膠)的體外聚集。這種聚集是由兩個(gè)分子之間的特異性反應(yīng)介導(dǎo)的，例如：抗體及抗原，抗體及抗原中的其中一個(gè)固定在所述乳膠顆粒的所述表面上，以增強(qiáng)靈敏度并擴(kuò)展中和點(diǎn)(the point of equivalence)。將包含感興趣的配體(ligand)的一流體引入所述多個(gè)敏化的載體顆粒的一懸浮液中，并且所述凝集被表示為所述配體的指示。所述凝集反應(yīng)可以以幾種不同的方式用于檢測(cè)所述感興趣的配體，并且每種方式都有其自身的局限性及應(yīng)用。

有許多基于光散射現(xiàn)象的技術(shù)而用于檢測(cè)乳膠顆粒的凝集：比濁法(turbidimetry)、濁度測(cè)定法(nephelometry)、角度各向異性(angular anisotropy)及光子相關(guān)光譜法。比濁法包括測(cè)量所述入射光束穿過(guò)所述樣品時(shí)的強(qiáng)度。所述光束可以穿過(guò)一懸浮液，或者被所述多個(gè)顆粒吸收、反射或散射。結(jié)果，光的強(qiáng)度隨著其傳播通過(guò)所述懸浮液而降低。對(duì)于不吸收的多個(gè)顆粒，由于散射所引起的光強(qiáng)度的降低表示為濁度(turbidity)。這種技術(shù)快速且易于使用。實(shí)際上，比濁法不需要除了分光光度計(jì)以外的任何特殊設(shè)備，而所述分光光度計(jì)通常可在臨床實(shí)驗(yàn)室中使用。

全自動(dòng)分光光度計(jì)不僅可以在一所需的時(shí)間自動(dòng)測(cè)量透射光，還可以將方便量的試劑緩沖液及樣品稀釋、移液并轉(zhuǎn)移到所述比色皿中，在一設(shè)定的溫度下培養(yǎng)并使用選定的算法及校準(zhǔn)曲線來(lái)進(jìn)行必要的計(jì)算。在這些自動(dòng)分析儀中進(jìn)行乳膠凝集測(cè)試的可能性允許在一短時(shí)間內(nèi)處理數(shù)百個(gè)樣品，而無(wú)需投資新的儀器或人員。

然而，為了優(yōu)化凝集過(guò)程中發(fā)生的所述濁度變化，重要的是選擇合適的粒徑。例如，在所述免疫凝集過(guò)程中，成對(duì)的顆粒之間的抗原-抗體橋的數(shù)量約為2至10。對(duì)于較大的顆粒，當(dāng)在自動(dòng)機(jī)械中高速泵送時(shí)，跨過(guò)這些橋的所述剪切力(shear forces)可能會(huì)導(dǎo)致凝集物破裂。因此，較小直徑的多個(gè)顆粒可以產(chǎn)生更穩(wěn)定的測(cè)定。為了使多個(gè)顆粒凝集，首先所述多個(gè)顆粒必須發(fā)生碰撞，才能形成抗原-抗體橋。對(duì)于分子及小顆粒，擴(kuò)散是足夠快的以產(chǎn)生用于聚集體(aggregate)形成所需的初始碰撞。如果所述多個(gè)顆粒是大的，則擴(kuò)散減少(即，所述凝集動(dòng)力學(xué))，因?yàn)樗鰯U(kuò)散系數(shù)與粒徑成反比。小顆粒是理想的，因?yàn)樾枰黾宇w粒或聚集體之間的碰撞頻率以提高免疫聚集體的產(chǎn)生速率。