[實(shí)用新型]一種熱循環(huán)熒光檢測(cè)儀

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201821974473.1
• 申請(qǐng)日: 2018-11-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN209412222U
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-09-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張家林
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 張家林
• 主分類(lèi)號(hào): C12M1/38
• 分類(lèi)號(hào): C12M1/38;C12M1/34;C12M1/00;G01N21/64
• 代理公司: 浙江杭知橋律師事務(wù)所 33256
• 代理人: 王梨華;陳麗霞

本實(shí)用新型涉及熒光檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種熱循環(huán)熒光檢測(cè)儀。包括反應(yīng)腔和熒光檢測(cè)系統(tǒng)，反應(yīng)腔用于放置盛有待檢測(cè)的DNA片段的PCR反應(yīng)管，熒光檢測(cè)系統(tǒng)用于采集PCR反應(yīng)管中液體放出的熒光，將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)輸出，熒光檢測(cè)系統(tǒng)包括發(fā)光光源、第一干涉濾光片、第二干涉濾光片、檢測(cè)鏡頭和面陣光電傳感器，第二干涉濾光片設(shè)于檢測(cè)鏡頭和面陣光電傳感器之間。第一干涉濾光片設(shè)于發(fā)光光源和待檢測(cè)的PCR管之間。本實(shí)用新型相比現(xiàn)有技術(shù)能夠縮短光程，簡(jiǎn)化熒光檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，體積小，重量輕，易于攜帶和使用。熒光檢測(cè)系統(tǒng)具有高通量，能夠同時(shí)完成96個(gè)或384個(gè)以上DNA樣本的PCR反應(yīng)和熒光檢測(cè)，無(wú)需光纖導(dǎo)光，無(wú)運(yùn)動(dòng)部件磨損，免去周期維護(hù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及熒光檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及了一種熱循環(huán)熒光檢測(cè)儀的設(shè)計(jì)。

背景技術(shù)

熱循環(huán)儀是使反應(yīng)物在指定變性溫度、復(fù)性溫度和延伸溫度之間自動(dòng)循環(huán)的儀器。當(dāng)盛有PCR反應(yīng)液與DNA樣本的PCR反應(yīng)管放入熱循環(huán)儀，經(jīng)過(guò)溫度循環(huán)后，樣本DNA片段擴(kuò)增百萬(wàn)倍。若在反應(yīng)液中加有熒光素如SYBR或相關(guān)的熒光DNA探針，能通過(guò)熒光信號(hào)得到DNA片段的數(shù)量，通過(guò)監(jiān)測(cè)反應(yīng)管內(nèi)熒光信號(hào)的變化來(lái)實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物?；诿骊嚬怆妭鞲衅鞒上竦臒晒鈾z測(cè)系統(tǒng)的熱循環(huán)儀具有高通量，使用專(zhuān)業(yè)的QPCR試劑可以一次同時(shí)完成96個(gè)或384個(gè)以上DNA樣本的PCR反應(yīng)和熒光檢測(cè)。但是體積大，難以攜帶，根本原因是光程長(zhǎng)，熒光檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，如羅氏LC480熱循環(huán)熒光檢測(cè)儀的光程達(dá)到800mm。

檢測(cè)時(shí)PCR反應(yīng)管發(fā)射的熒光經(jīng)過(guò)干涉濾光片濾光后到達(dá)面陣光電傳感器表面，干涉濾光片的濾光效果對(duì)光線的入射角度很敏感，垂直入射最好，而偏離法線的角度增大，會(huì)引起中心波長(zhǎng)向短波方向移動(dòng)，帶寬增加，透射率減少。因此若是單純縮短光程，會(huì)增大光線的入射角，影響到檢測(cè)結(jié)果。公開(kāi)號(hào)為CN1309766A的于2000年11月15日進(jìn)入中國(guó)的國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)了用于監(jiān)測(cè)DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的儀器，包括一個(gè)光源，發(fā)射使基本染料發(fā)出熒光的基本激發(fā)頻率；第一部件，用來(lái)接收具有激發(fā)頻率的可成為激發(fā)光束的光源光束；基本聚焦部件，用來(lái)使激發(fā)光束聚焦到各個(gè)懸浮液中，以使基本染料發(fā)出具有發(fā)射頻率的發(fā)射光束，該基本聚焦部件可接收和透過(guò)發(fā)射光束；第二部件，用來(lái)接收來(lái)自該基本聚焦部件的發(fā)射光束；發(fā)射聚焦部件，用來(lái)聚焦發(fā)射光束；探測(cè)器，接收來(lái)自第二部件和發(fā)射聚焦部件的發(fā)射光束，產(chǎn)生代表相應(yīng)的各個(gè)小瓶中的DNA濃度的基本數(shù)據(jù)信號(hào)；處理部件，利用接收到的基本數(shù)據(jù)信號(hào)計(jì)算出基本信號(hào)數(shù)據(jù)和相應(yīng)的DNA濃度。第一部件還包含激發(fā)濾光器，第二部件還包含發(fā)射濾光器，第一和第二部件共有一分光器，激發(fā)濾光器被放置于光源與分光器之間，發(fā)射濾光器被放置于分光器與探測(cè)器之間，激發(fā)濾光器讓具有激發(fā)頻率的光通過(guò)而擋住具有發(fā)射頻率的光，發(fā)射濾光器則讓具有發(fā)射頻率的光通過(guò)而擋住具有激發(fā)頻率的光，激發(fā)濾光器和分光器共同接收光源光束而產(chǎn)生出激發(fā)光束，發(fā)射濾光器與分光器共同接收發(fā)射光束以使具有發(fā)射頻率的發(fā)射光束透過(guò)而到達(dá)探測(cè)器。該專(zhuān)利中需要采用分光器來(lái)進(jìn)行分光，同時(shí)為了滿足濾光器的入射角條件，分光器需呈一定角度放置，優(yōu)選為45°，此時(shí)儀器內(nèi)部光程長(zhǎng)，分光器占據(jù)的空間大，從而造成儀器體積大，攜帶和使用不便的問(wèn)題。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的熒光光路長(zhǎng)缺點(diǎn)，提供了一種熱循環(huán)熒光檢測(cè)儀。

本實(shí)用新型解決了熒光光路長(zhǎng)，縮短光路會(huì)影響干涉濾光片效果的問(wèn)題，本設(shè)計(jì)方案通過(guò)改變干涉濾光片位置，采用由若干透鏡組合形成的光學(xué)成像鏡頭，達(dá)到在縮短光路同時(shí)不影響干涉濾光片效果的作用。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本實(shí)用新型通過(guò)下述技術(shù)方案得以解決：