[實用新型]一種免疫共沉淀試劑盒

有效

• 申請號: 201820655765.2
• 申請日: 2018-05-03
• 公開（公告）號: CN208377352U
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 劉靜;董先輝;王曉香;鐘健翔
• 申請（專利權）人: 廣州伯信生物科技有限公司
• 主分類號: B65D25/10
• 分類號: B65D25/10;B65D81/05;B65D55/02;G01N33/68
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471
• 代理人: 郭亞芳

本實用新型涉及一種免疫共沉淀試劑盒，包括盒蓋、海綿墊和盒體，所述盒體設有容納腔，所述海綿墊置于所述容納腔內；所述海綿墊設有容器孔，所述容器孔內分別設有第一試劑瓶、第二試劑瓶和EP管；所述第一試劑瓶包括PBS試劑瓶、Wash Buffer I試劑瓶和Wash BufferⅡ試劑瓶；所述第二試劑瓶包括Cell lysis buffer試劑瓶；所述EP管包括Protease Inhibitor EP管、Protein A/G?agarose beads EP管、IgG EP管、Cross?linking agent(50mM)EP管和Elution buffer EP管；使用本實用新型，能夠方便的進行免疫共沉淀試驗，免除抗體信號干擾。

技術領域

本實用新型涉及生物技術領域，具體涉及一種不存在抗體信號干擾目的蛋白信號的免疫共沉淀試劑盒。

背景技術

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是基于抗體和抗原之間結合的專一性用于研究蛋白質相互作用的經典方法，是確定蛋白質是否在生理條件下有相互作用的有效方法。

然而，傳統的由于免疫沉淀實驗使用目的蛋白抗體加Protein A/G-瓊脂糖珠/磁珠與樣品孵育，因此在最后離心獲得抗體-瓊脂糖珠/磁珠復合物后，離心管中主要含有抗體、目的蛋白、Protein A/G-瓊脂糖珠/磁珠以及一些其它非特異性作用蛋白。其中，抗體和目的蛋白以及Protein A/G-瓊脂糖珠/磁珠三者之間是以非共價健結合在一起，只有Protein A/G與瓊脂糖珠/磁珠是共價結合在一起的。因此，最后經過添加含巰基乙醇的加樣緩沖液以及煮沸變性并離心出去 Protein A/G-瓊脂糖珠/磁珠后，離心管含有抗體和目的蛋白以及少量非特異性吸附蛋白。這樣SDS-PAGE中就至少含有目的蛋白和抗體二種蛋白，由于加樣緩沖液中含有巰基乙醇和高溫從而導致抗體的重鏈與輕鏈之間的二硫鍵被破壞從而使得抗體分子變成重鏈分子(55KD)和輕鏈分子(25KD)。因此，WB顯色反應中除了能檢測到目的蛋白外，如果所使用的二抗與用于免疫沉淀實驗的抗體分子屬于同一種屬的話，還能檢測到重鏈和輕鏈分子。通常用于免疫沉淀的抗體量非常大(1ug)，所以當目的蛋白的大小接近重鏈或者輕鏈分子時，重鏈或者輕鏈分子的WB信號常常由于信號過強而導致影響對目的蛋白的WB結果的判斷。

由此可見，傳統的Co-IP方法存在抗體信號干擾目的蛋白信號的缺點，雖然可以通過選擇不同種屬的抗體分別進行免疫沉淀實驗和WB實驗，然后再選擇一個種屬交叉反應比較弱或者無種屬交叉反應的二抗進行WB實驗，減弱重鏈和輕鏈分子的WB信號，但會大大增加實驗成本和實驗設計復雜性。

實用新型內容

為了解決現有技術存在的問題，本實用新型提供了一種免疫共沉淀試劑盒；包括盒蓋、海綿墊和盒體，海綿墊設有試劑瓶和EP管，所述試劑瓶和EP管分別裝有PBS、WashBuffer I、Wash BufferⅡ、Cell lysis buffer、Protease Inhibitor、 Protein A/G-agarose beads、IgG、Cross-linking agent和Elution buffer，使用本實用新型，能夠方便的進行免疫共沉淀試驗，免除抗體信號干擾。

本實用新型的目的是提供一種排除抗體信號干擾目的蛋白信號的免疫共沉淀試劑盒，包括盒蓋、海綿墊和盒體，所述盒體設有容納腔，所述海綿墊置于所述容納腔內；所述海綿墊設有容器孔，所述容器孔內分別設有第一試劑瓶、第二試劑瓶和EP管；所述第一試劑瓶包括PBS試劑瓶、Wash Buffer I試劑瓶和Wash BufferⅡ試劑瓶；所述第二試劑瓶包括Cell lysis buffer試劑瓶；所述EP 管包括Protease Inhibitor EP管、Protein A/G-agarose beads EP管、IgG EP管、 Cross-linking agent EP管和Elution buffer EP管。