[發明專利]一種磷酸化改性的鱈魚膠原蛋白肽的制備方法

在審

• 申請號: 201811652077.1
• 申請日: 2018-12-31
• 公開（公告）號: CN109527193A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 鞠文明;孫永軍;唐曉波;李俊峰;鞠曉慶;王淑清;畢囡囡;王鵬程;蔡英英
• 申請（專利權）人: 山東好當家海洋發展股份有限公司
• 主分類號: A23J1/04
• 分類號: A23J1/04;A23J3/04;A23J3/34
• 代理公司: 濟南日新專利代理事務所 37224
• 代理人: 李蕾蕾

本發明公開了一種磷酸化改性的鱈魚膠原蛋白肽的制備方法，其包括以下步驟：（1）將鱈魚鱗片依次在清水、碳酸氫鈉溶液、檸檬酸溶液、EDTA溶液中清洗；（2）將步驟1中得到清洗后的鱈魚鱗片中加入蛋白酶，水解隨后滅活，離心，取得上清液；（3）將步驟2得到的上清液脫鹽，分離棄去1000Da以下的組分，凍干，得到鱈魚膠原蛋白肽干粉，并溶解到水中；（4）將步驟3的溶液加熱，調節pH，隨后加入三聚磷酸鈉，攪拌反應；（5）收集步驟4的反應液，脫鹽，凍干得到磷酸化改性的鱈魚膠原蛋白肽。本發明的方法通過對膠原蛋白進行預處理，實現了磷酸化加工的更高效進行，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及肽的制備，尤其是一種磷酸化改性的鱈魚膠原蛋白肽的制備方法。

背景技術

鱈魚，是鱈科（Gadidae）魚類及鱈形目（Gadiformes）其他科部分魚類的統稱，有50多種，是主要食用魚類之一。鱈魚原產于從北歐至加拿大及美國東部的北大西洋寒冷水域。21世紀初，鱈魚主要出產國是加拿大、冰島、挪威及俄羅斯，日本產地主要在北海道。鱈魚是經濟價值較高的高檔魚類，常將其魚肉用于煎制等用途。然而其魚鱗和魚皮往往得不到良好的利用，往往只能作為下腳料加工成肥料或者飼料，其經濟附加值較低。目前，可以將其魚鱗和魚皮制備成膠原蛋白肽，然而該膠原蛋白肽在水中的分散性較差，難以作為高檔的口服液等用途來進行使用。

發明內容

為了克服現有鱈魚膠原蛋白肽在水中的分散性差的不足，本發明的目的在于提供了一種磷酸化改性的鱈魚膠原蛋白肽的制備方法。

在本發明的一個方面，提供了一種磷酸化改性的鱈魚膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟：

（1）將鱈魚鱗片依次在清水、1-5%的碳酸氫鈉溶液、1-3%的檸檬酸溶液、1-5%的EDTA溶液中清洗；

（2）將步驟1中得到的清洗后的鱈魚鱗片中加入蛋白酶，并且在40-50攝氏度下，pH為6-8下水解3-5小時并且隨后滅活，離心并且取得上清液；

（3）將步驟2得到的上清液脫鹽，分離棄去1000Da以下的組分，凍干并且得到鱈魚膠原蛋白肽干粉，取用100重量份，并且溶解到10000-20000重量份的水中；

（4）將步驟3的溶液加熱到30-40攝氏度，pH調節到7.5-8.5，隨后加入三聚磷酸鈉1-5重量份，并且攪拌反應2-5小時；

（5）收集步驟4的反應液，脫鹽并且凍干得到磷酸化改性的鱈魚膠原蛋白肽。

在本發明優選的方面，在步驟1中，將鱈魚鱗片依次在清水、2%的碳酸氫鈉溶液、2%的檸檬酸溶液、3%的EDTA溶液中清洗，每次清洗15分鐘。

在本發明優選的方面，在步驟2中，在42攝氏度下，pH為7.2下水解4.5小時并且隨后滅活，離心并且取得上清液。

在本發明優選的方面，在步驟2中，所述的蛋白酶是中性蛋白酶和堿性蛋白酶按照1:1-3重量比配置成的。

在本發明優選的方面，在步驟2中，所述的蛋白酶是中性蛋白酶或者堿性蛋白酶。

在本發明優選的方面，在步驟3中，所述的分離采取凝膠排阻色譜或者透析方法來進行。

在本發明優選的方面，將步驟3的溶液加熱到35攝氏度，pH調節到8.0，加入三聚磷酸鈉3.5重量份，并且攪拌反應4小時。

本發明的方法通過對膠原蛋白進行預處理，實現了磷酸化加工的更高效進行，具有廣闊的應用前景。

具體實施方式

除非另外地說明，本發明所使用的鱈魚鱗片采購自本地水產加工廠的下腳料區域，其始終在0-4攝氏度下保存并且保持新鮮。

實施例1