[發明專利]一種利用囊胚培養液檢測胚胎健康狀況的方法和產品

有效

• 申請號: 201811647225.0
• 申請日: 2018-12-29
• 公開（公告）號: CN109536581B
• 公開（公告）日: 2022-02-01
• 發明（設計）人: 姚雅馨;李文璐;馬杰良;陸思嘉
• 申請（專利權）人: 序康醫療科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12M1/00;C12M1/34
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

本發明提供了一種利用囊胚培養液檢測胚胎健康狀況的方法和產品。具體地，本發明提供了一種體外利用囊胚培養液檢測胚胎健康狀況的方法，其特征在于，包括步驟：(a)提供第一囊胚培養體系，所述第一囊胚培養體系含有體外培養天數為D5?D6的囊胚；(b)將所述囊胚轉移到含新鮮囊胚培養液的第二囊胚培養體系中進行換液培養，所述換液培養的時間為T1，從而獲得經培養的囊胚培養液；(c)將所述經培養的囊胚培養液取出，從而獲得無細胞的經培養的囊胚培養液，即為檢測樣本；和(d)對所述檢測樣本進行基因檢測，從而鑒定所述囊胚的健康狀況。本發明提供的方法可去除IVF和ICSI技術過程中多余精子和母源顆粒細胞污染干擾的風險，并可精確的鑒定胚胎的健康狀況。

技術領域

本發明涉及生物醫學和分子細胞生物學領域，具體地，涉及一種利用囊胚 培養液檢測胚胎健康狀況的方法和產品。

背景技術

胚胎植入前遺傳學篩查(Preimplantation Genetic Screen，PGS)對體外培 養胚胎的染色體狀態進行檢測，以篩選染色體正常的胚胎置入母親子宮,從而將受 孕成功率提高到60％左右。各種檢測所需的生物樣本都是從體外培養的胚胎中采集 的一個至數個細胞、俗稱活檢，通過對這少量細胞的檢測反映整個胚胎的染色體是 否正常。理論上講，吸取出來的幾個細胞中的染色體狀態與胚胎中其它細胞一致， 檢測這幾個細胞即可了解該胚胎的染色體狀態是否正常。一般認為，此時吸取幾個 滋養層細胞不會對胚胎發育造成不良影響，目前從已出生嬰兒的健康狀況來看，這 一操作也確實沒有健康影響。但是，細胞取樣時對胚胎操作技術要求較高，如果稍 操作不當會導致胚胎嚴重損傷，損傷過于嚴重可造成胚胎發育終止；即使良好操作， 細胞取樣時不可避免地對胚胎造成細胞損失和輕微損傷，盡管現在尚無證據表明細 胞損失和輕微損傷會對胚胎發育和出生后健康發生不良影響，但該技術出現的時間 尚短(僅數年)，其對人的終生健康是否存在遠期影響仍然有待觀察；在少數情況 下，存在取樣獲得的幾個細胞的染色體狀態與胚胎中其它細胞的染色體狀態不同的 情況，導致檢測結果失誤。

近期，一種非活檢的、不取胚胎細胞，僅利用廢棄的囊胚培養液反應胚胎 健康狀況的方法得到研究，將原本廢棄的囊胚培養液處理后進行檢測分析，該 檢測分析結果可以間接的、且高精確性的反應出囊胚胚胎的健康狀態，不取任 何胚胎本身組分、不存在倫理問題，不會對胚胎帶來任何損失、消除健康影響 隱患，且操作簡單，安全性高，反應胚胎結果的準確性更高。

具體的常規的處理方式為：新鮮的體外受精卵在培養基中培養至D3，D3 將胚胎轉移至囊胚培養液中繼續培養至D5或D6，于D5或D6取走囊胚觀察胚 胎評級達到可冷凍級別后立刻實施冷凍操作，剩余的囊胚培養液即檢測時所需 要收集的樣本；臨床上選擇體外受精的方式通常為IVF和ICSI兩種，IVF通過 多個精子和卵母細胞共培養完成受精，ICSI為單精子注射完整受精。IVF胚胎 的透明帶周圍通常掛有多余精子，為避免精子的父源性DNA干擾，一般采用ICSI 受精方式。