[發明專利]一種酶活提高的金屬β-內酰胺酶突變體及其構建方法有效
| 申請號: | 201811601230.8 | 申請日: | 2018-12-26 |
| 公開(公告)號: | CN109337889B | 公開(公告)日: | 2020-10-02 |
| 發明(設計)人: | 李潤明;羅春;郝宇;丁姝元;邱壯偉;王金剛;陳舒明;粱巖 | 申請(專利權)人: | 廣州白云山拜迪生物醫藥有限公司;上海駿捷生化科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/86 | 分類號: | C12N9/86;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司: | 廣州三環專利商標代理有限公司 44202 | 代理人: | 顏希文;宋靜娜 |
| 地址: | 510000 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 提高 金屬 內酰胺 突變體 及其 構建 方法 | ||
1.一種酶活提高的金屬β-內酰胺酶突變體,其特征在于,所述突變體的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.如權利要求1所述的金屬β-內酰胺酶突變體,其特征在于,所述突變體在如SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列的基礎上,將第151位的脯氨酸突變成蘇氨酸。
3.如權利要求2所述的金屬β-內酰胺酶突變體,其特征在于,編碼SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
4.一種酶活提高的金屬β-內酰胺酶突變體基因,其特征在于,所述基因編碼權利要求1~3任一項所述酶活提高的金屬β-內酰胺酶突變體。
5.如權利要求4所述的金屬β-內酰胺酶突變體基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
6.一種工程菌,其特征在于,所述工程菌表達權利要求1~3任一項所述酶活提高的金屬β-內酰胺酶突變體。
7.如權利要求6所述的工程菌的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:在如SEQ IDNO:4所示的核苷酸序列的基礎上,將其編碼的第151位的脯氨酸突變成蘇氨酸,得到突變體重組基因,將重組基因連接到表達載體得到重組質粒,重組質粒轉化到DH5ɑ宿主菌中即得到工程菌。
8.如權利要求1~3任一項所述的酶活提高的金屬β-內酰胺酶突變體在制備金屬β-內酰胺酶中的應用。
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