[發明專利]一種在宮頸癌檢測中應用的試劑盒及其應用在審
| 申請號： | 201811555722.8 | 申請日： | 2018-12-18 |
| 公開（公告）號： | CN109554473A | 公開（公告）日： | 2019-04-02 |
| 發明（設計）人： | 李旭輝;張雷;郭書娟 | 申請（專利權）人： | 敬善生物科技江蘇有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 北京漢鼎理利專利代理事務所(特殊普通合伙) 11618 | 代理人： | 潘滿根 |
| 地址： | 226499 江蘇省南*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 宮頸癌 試劑盒 基因甲基化 應用 基因 甲基化DNA 區域比較 甲基化 鎖核酸 外顯子 陽性率 轉錄本 檢出 引物 修飾 靈敏 上游 | ||
1.一種在宮頸癌檢測中應用的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括檢測MSF1基因甲基化的試劑，所述檢測MSF1基因甲基化的試劑是檢測MSF1基因第2種轉錄本NM_001113493.1的第一個外顯子上游225～305bp處的CpG島區段甲基化的試劑。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括樣品DNA提取試劑、DNA甲基化修飾轉化試劑以及基于熒光定量PCR方法檢測MSF1基因甲基化的試劑，所述基于熒光定量PCR方法檢測MSF1基因甲基化的試劑是檢測MSF1基因第2種轉錄本NM_001113493.1的第一個外顯子上游225～305bp處的CpG島區段甲基化的試劑。
3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括用PCR方法檢測內對照參考基因的試劑，所述內對照參考基因優選為ACTB基因；檢測所述內參基因的試劑包括一對非甲基化位點擴增引物、一條檢測非甲基化位點探針。
4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于：檢測所述ACTB基因的試劑包括擴增ACTB基因引物和探針：
上游引物序列SEQ ID NO:2：ATAATAAAAAGGAGGTTGGAT；
下游引物序列SEQ ID NO:3：CTCCCRCAAAACAACCAC；
檢測探針序列SEQ ID NO:4：CCACCTTACCCTAAACACTACAAC。
5.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于：所述檢測MSF1基因甲基化的試劑包括擴增MSF1基因的一對在5’端鎖核酸修飾的引物和一條檢測甲基化位點的探針：
上游引物序列SEQ ID NO:5：+TT+T+AGTTAGCGCGTAGGGTTC；
下游引物序列SEQ ID NO:6：+AA+C+TAATAAACAACGAATCGCG；
檢測探針序列SEQ ID NO:7：ACGCCCCCGACGAAACC。
6.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于：所述樣品DNA來自于宮頸組織和/或宮頸細胞刷片DNA。
7.權利要求1-6任一所述的試劑盒在宮頸癌檢測中的應用。
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