[發明專利]一種食品添加劑的制備方法和應用

在審

• 申請號: 201811551246.2
• 申請日: 2018-12-18
• 公開（公告）號: CN109770323A
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發明（設計）人: 王靖;李皓然;祁飛;陳博;丁子元;王小艷;許克家;田芳;李帥朋;李文杰;朱鏡羲;楊凱;劉安妮
• 申請（專利權）人: 金禾益康（北京）生物科技有限公司
• 主分類號: A23L27/30
• 分類號: A23L27/30;A23L29/00
• 代理公司: 北京東方芊悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11591
• 代理人: 彭秀麗

1.一種雙酶法制備葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，以甜葉菊提取物與麥芽糊精的混合物為底物，底物濃度為20％-55％，加入環糊精糖基轉移酶和β-淀粉酶進行雙酶催化后，獲得葡萄糖基甜菊糖苷粗產品；

其中，

所述甜葉菊提取物中總苷含量不小于50％；

所述底物中甜葉菊提取物和麥芽糊精的添加質量比為1：(1-5)；

所述環糊精糖基轉移酶和β-淀粉酶的質量比為(1.1-1.3)：1。

2.一種如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法制備獲得的葡萄糖基甜菊糖苷粗產品中在C13或C19位上通過a-1,4鍵連接有1個、2個或3個葡萄糖基的甜菊糖苷，也稱為甜菊糖苷G1-G3，占葡萄糖基甜菊糖苷粗產品總苷含量的70％以上。

3.一種如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述甜葉菊提取物中的總苷由甜菊糖、萊鮑迪苷A(RA)、萊鮑迪苷D(RD)、萊鮑迪苷M(RM)、萊鮑迪苷C(RC)、萊鮑迪苷B(RB),萊鮑迪苷E(RE)，甜茶苷，懸鉤子苷、杜克苷A、杜克苷B、甜菊醇、異甜菊醇、甜菊單糖苷，甜菊雙糖苷、甜菊三糖苷(STv)中的一種或多種組成。

4.如權利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，其中：以甜葉菊提取物與麥芽糊精的混合物為底物，將所述甜葉菊提取物與麥芽糊精混合物溶于水；

優選的，底物濃度為25％-45％；

更優選的，所述底物中甜葉菊提取物和麥芽糊精的添加質量比為1：3；

進一步優選的，所述環糊精糖基轉移酶和β-淀粉酶的質量比為1.25：1。

5.如權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一：在酶催化反應罐中以底物濃度為25％-45％將麥芽糊精和甜葉菊提取物溶解在60℃-70℃的水中，以150rpm進行攪拌助溶，其中麥芽糊精和甜葉菊提取物的投放質量比為1.5:1-4:1；

步驟二：加入終濃度為0.5-1.0mg/mL的環糊精糖基轉移酶，于60℃-70℃、50-100rpm的條件下反應15-25小時，隨后加入終濃度為0.4-0.85mg/mL的β-淀粉酶，于60℃-70℃、50-100rpm的條件下反應1小時；

步驟三：酶催化反應后，調節酶催化反應罐升溫至90℃，保持30分鐘，隨后降溫至室溫，獲得酶催化的葡萄糖基甜菊糖苷粗產品。

6.一種獲得精制葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一：使用權利要求1-5任一項所述方法獲得葡萄糖基甜菊糖苷粗產品；

步驟二：使用一步樹脂法，對葡萄糖基甜菊糖苷粗產品進行分離精制；

第三步：回收獲得葡萄糖基甜菊糖苷精制產品。

7.一種如權利要求6所述的獲得精制葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，

步驟一：使用權利要求1-5任一項所述方法獲得葡萄糖基甜菊糖苷粗產品；

步驟二：將步驟一獲得的葡萄糖基甜菊糖苷粗產品中加入活性炭進行脫色，然后通過板框過濾，去除活性炭；取過濾液過大孔吸附樹脂，樹脂飽和后進行水洗，水洗用量約為柱內樹脂裝填體積的5-8倍，沖洗至無甜味；之后用60％乙醇洗脫，乙醇用量約為柱內樹脂裝填體積的1-1.5倍，沖洗至無甜味，收集洗脫的糖液；將洗脫后的糖液轉入單效蒸發器脫醇，濃縮條件為：料液溫度為75℃-90℃、負壓0.04-0.06MPa、設備夾層壓力為0.2MPa-0.3MPa，待料液脫醇完全后停止設備，開啟排空閥至常壓后獲得濃縮液，加水稀釋至固含量20％以下；

步驟三：將步驟二獲得的料液進行噴霧干燥，并回收，最終獲得葡萄糖基甜菊糖苷精制產品。

8.一種使用權利要求1-5任一項所述方法制備獲得的葡萄糖基甜菊糖苷粗產品，其特征在于，所述葡萄糖基甜菊糖苷粗產品中在C13或C19位上通過a-1,4鍵連接有1個、2個或3個葡萄糖基的甜菊糖苷，也稱為甜菊糖苷G1-G3，占葡萄糖基甜菊糖苷粗產品總苷含量的70％以上，且整體催化體系葡萄糖基甜菊糖苷轉化率可達到90％。