[發明專利]一種抗菌肽Cec4的雜合肽或其鹽及應用

有效

• 申請號: 201811546304.2
• 申請日: 2018-12-18
• 公開（公告）號: CN109553690B
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發明（設計）人: 彭建;劉巍巍;趙行行;吳建偉
• 申請（專利權）人: 貴州醫科大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K38/17;A61P31/04
• 代理公司: 北京聯創佳為專利事務所(普通合伙) 11362
• 代理人: 郭防;李祎

本發明提供了提供一種抗菌肽Cec4的雜合肽或其藥學上可接受的鹽，采用有較強抗菌能力的外源肽替換Cec4的C端、Cec4的N端以及插入到Cec4中這三種方式與母肽Cec4雜合，經研究表明本發明所設計的雜合肽均無溶血活性且在實驗中表現出與母肽Cec4相當或更強的抑菌活性，為抗菌肽的進一步優化和在在制備抗革蘭氏陰性菌藥物中的應用奠定基礎。

技術領域

本發明屬于蛋白質工程領域，具體涉及一種抗菌肽Cec4的雜合肽或其藥學上可接受的鹽及其在制備抗革蘭氏陰性菌藥物中的應用。

背景技術

自1928年Fleming發現青霉素以來，已有數百種抗生素用于控制和治療細菌性感染疾病。大量廣譜抗生素的使用加速了致病菌的進化，使得近年來多種耐藥細菌不斷出現。然而，新型抗生素的研發并沒有伴隨著細菌耐藥性的增強而加快，近年來幾乎沒有新型抗生素入市。耐藥細菌及超級細菌的產生與抗生素的缺乏使得新型抗菌藥物的研發已迫在眉睫。

1972年，Boman從惜古比天蠶中發現并提純得到了抗菌肽(antimicrobialpeptides)天蠶素(cecropins)，抗菌肽有助于生物體能夠抵御自然界中許多有害微生物的侵染。種類繁多的昆蟲，是抗菌肽資源的寶庫。迄今，發現超過200多種昆蟲抗菌肽類物質。昆蟲抗菌肽主要分為4類(李賽男，2006；王煒和任偉宏，2013；李冠楠等，2014；王龍等，2017)，且作用機制各異(Matsuzaki et al.，1998；張宇等，2018；李穎等，2005)。來自不同物種的抗菌肽的一級結構有不少相似之處：分子量小、通常是由12～60個氨基酸組成、高于30％的疏水性氨基酸、兩親性、含+2-+9的陽離子多肽、N端親水、C端疏水、耐熱、對原核生物有高的殺菌活性(陳琛等,2014)。抗菌肽具有獨特的抗菌作用機制，迅速殺菌作用且不易引發細菌的耐藥性，可單獨或與抗生素聯合使用殺傷病原體(劉世財等，2016；金元寶等，2017)。由于抗菌肽具有分子量小，無免疫原性、熱穩定性強、廣譜殺菌等特性，被認為極具開發為新型抗生素的潛力。

根據抗菌肽的性質及作用機理，選擇一種抗菌肽為藍本，將它截斷后與另一種抗菌肽的片段拼接，人工設計出雜合肽是提升抗菌肽性能的一種有效手段(Boman，1989)。研究表明，一些經過的改造抗菌肽具有與母本相似或更高的抗菌活性。將CecropinA和Melittin不同片段拼接，成功篩選到了肽鏈變短但活性更強的雜合肽，與母肽蜂毒肽Melittin相比，具有更低的溶血性。將抗菌肽CecropinAl的N端(KWKLFKKI)與雞源抗菌肽Cathelicidin-2(CATH-2)的兩段α-螺旋結構域拼接，抗菌實驗發現與母肽相比，雜合肽最小抑菌濃度降低了100倍(孔政和趙德剛，2008；李國棟等，2006)。本課題組所研究的抗菌肽Cec4在抗菌方面具有獨特的優勢，但其抗菌能力、抗菌譜及毒性安全等方面尚需要進一步優化(龍慧玲等，2017)。

發明內容

本發明的目的是提供一種抗菌肽Cec4的雜合肽或其藥學上可接受的鹽，以期獲得具有更廣抗菌譜和更高抗菌活性的雜合肽，并提供其在制備抗革蘭氏陰性菌藥物中的應用。

為達到上述目的，本發明采用如下的技術方案：

一種抗菌肽Cec4的雜合肽或其藥學上可接受的鹽，它是采取雜合的方式對抗菌肽Cec4進行改造而得的。本發明以具有較好抗菌效果的Cec4為母肽，采用有較強抗菌能力的外源肽替換Cec4的C端、Cec4的N端以及插入到Cec4中這三種方式與母肽Cec4雜合。除抗菌肽本身外，本發明的抗菌肽也可以和藥學上可接受的鹽結合，同樣具有其藥效，包括(但不同限于)與堿金屬或堿土金屬(如鈉、鉀、鈣或鎂)形成的鹽，還包括與如下無機酸形成的鹽：如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸，以及與有機酸形成的鹽，而有機酸則指乙酸、草酸、丁二酸、酒石酸、甲磺酸和馬來酸。藥學上可接受的鹽優選鈉鹽。