[發(fā)明專利]一種含有外泌體用于干眼治療的滴眼液及其制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811538991.3 | 申請日： | 2018-12-14 |
| 公開（公告）號： | CN109431985A | 公開（公告）日： | 2019-03-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李娟;龍乾發(fā);周穎;王甜;鮮盼盼;邵毅;譚鋼 | 申請（專利權(quán)）人： | 西安市第四醫(yī)院 |
| 主分類號： | A61K9/08 | 分類號： | A61K9/08;A61K47/22;A61K47/32;A61K35/28;A61P27/02 |
| 代理公司： | 蕪湖思誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 34138 | 代理人： | 楊濤 |
| 地址： | 710004 陜*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 滴眼液 干眼 滲透壓調(diào)節(jié)劑 維生素E 制備 治療 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 末梢血管擴(kuò)張 梯度離心法 眼睛晶狀體 過氧化脂 密封容器 血液循環(huán) 質(zhì)量分?jǐn)?shù) 注射用水 卡波姆 粘稠度 分裝 配置 無菌 安全 | ||
1.一種含有外泌體用于干眼治療的滴眼液，其特征在于，其組分含量具體包括：2.5％的外泌體、輔配料、余量為注射用水，各原料的含量總和為100％，所屬輔配料包括占比為總質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.2％的維生素E、0.2的卡波姆、2％的滲透壓調(diào)節(jié)劑，所述外泌體為從人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中提取，所述維生素E可抑制眼睛晶狀體內(nèi)的過氧化脂反應(yīng)，使末梢血管擴(kuò)張，改善血液循環(huán)，所述卡波姆使滴眼液達(dá)到合適的粘稠度，所述滲透壓調(diào)節(jié)劑為NaCl。
2.如權(quán)利要求1所述的一種含有外泌體用于干眼治療的滴眼液的制備方法，其特征在于，其步驟包括：
1、外泌體的提?。哼x擇增值能力強、狀態(tài)好的第3～5代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，將細(xì)胞培養(yǎng)至50％融合后，更換為不含外泌體的血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)48h，收集MSC培養(yǎng)上清，用梯度離心法提取外泌體；
2、密封容器的準(zhǔn)備：準(zhǔn)備一個可進(jìn)行密封的不銹鋼容器，進(jìn)行高溫消毒殺菌；
3、輔配料配置：將占總量0.2％維生素E、0.2％卡波姆、2％NaCl粉末混合均勻，采用射線消毒殺菌；
4、滴眼液配置：在可密封的不銹鋼容器中加入占總量為95.1％的注射用水，再加入消毒后的占總量2.5％外泌體和占總量0.2％維生素E，0.2％卡波姆，2％NaCl粉末混合均勻的輔配料，持續(xù)攪拌24小時后，濾去不溶的雜質(zhì)，操作全程注意無菌操作，以2ml每只分裝，密封得到成品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含有外泌體用于干眼治療的滴眼液的制備方法，其特征在于，所述外泌體的提取的梯度離心法具體為設(shè)置參數(shù)為4℃，300g，10min離心，取上清繼續(xù)4℃，2000g，10min離心，接著取上清4℃，10000g，30min離心，最后取上清4℃，100000g，70min離心，沉淀即為外泌體，用PBS懸浮外泌體，-80℃長期保存。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含有外泌體用于干眼治療的滴眼液的制備方法，其特征在于，還包括外泌體形態(tài)的堅定，利用透射電鏡鑒定外泌體的形態(tài)，WB檢測外泌體特異性表面抗原CD63、CD81的表達(dá)。
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