[發(fā)明專利]同時(shí)檢測(cè)乳粉制品中多種小分子水溶性物質(zhì)的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811523981.2
• 申請(qǐng)日: 2018-12-13
• 公開（公告）號(hào): CN109696449A
• 公開（公告）日: 2019-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李瑋;耿健強(qiáng);吳燕濤;楊紅梅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京市食品安全監(jiān)控和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心（北京市食品檢驗(yàn)所）
• 主分類號(hào): G01N24/08
• 分類號(hào): G01N24/08
• 代理公司: 北京林達(dá)劉知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

本發(fā)明提供了一種同時(shí)檢測(cè)乳粉制品中多種小分子水溶性物質(zhì)的方法，所述方法包括如下步驟：a.采用定量核磁共振方法對(duì)所述乳制品樣品進(jìn)行檢測(cè)，并得到¹H?NMR圖譜的步驟；b.確定所述¹H?NMR圖譜中各小分子水溶性成分的定量信號(hào)峰的歸屬；c.對(duì)確定了歸屬的各定量信號(hào)峰進(jìn)行去卷積處理，并計(jì)算各小分子水溶性成分的含量。其檢測(cè)的精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性及回收率均優(yōu)于傳統(tǒng)qNMR定量方法，為今后嬰配乳粉的配方研發(fā)、產(chǎn)品生產(chǎn)、質(zhì)量質(zhì)控、安全檢測(cè)提供技術(shù)支持。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明技術(shù)方案屬于食品檢測(cè)領(lǐng)域，具體而言屬于乳粉類制品的成分檢測(cè)領(lǐng)域，尤其的，屬于嬰幼兒配方乳粉成分檢測(cè)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

嬰幼兒配方乳粉是以牛乳、羊乳等為原料，適當(dāng)添加營(yíng)養(yǎng)素，使其總合成份能供給嬰兒生長(zhǎng)與發(fā)育所需要之一種人工食品。為能最大程度的模擬母乳，滿足嬰幼兒的生長(zhǎng)發(fā)育需要，生產(chǎn)廠商會(huì)按照配方設(shè)計(jì)添加核苷酸、有機(jī)酸、氨基酸等添加劑，這些小分子水溶性物質(zhì)在嬰幼兒的免疫調(diào)節(jié)、提高記憶力、改善腸道菌群及促進(jìn)機(jī)體代謝等方面都發(fā)揮重要的作用。因此，對(duì)配方乳粉中小分子水溶性物質(zhì)的質(zhì)量監(jiān)控極為重要。

目前，國(guó)標(biāo)多采用高效液相色譜法、分光光度法等方法以標(biāo)準(zhǔn)品作為參比，對(duì)其中的一個(gè)或一類物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，其缺點(diǎn)在于：(1)只針對(duì)一類物質(zhì)中的幾個(gè)化合物進(jìn)行檢測(cè)，難以全面反應(yīng)乳粉真實(shí)質(zhì)量：如，核苷酸在體內(nèi)是以核苷的形式被吸收利用的，母乳和嬰幼兒配方乳粉中均含有核苷和核苷酸，但國(guó)標(biāo)中只規(guī)定了5種核苷酸的檢測(cè)方法，缺少核苷的檢測(cè)方法，難以全面反應(yīng)乳粉中核苷酸類成分的真實(shí)量值；(2)檢測(cè)效率低：受到儀器檢測(cè)原理等原因的限制，高效液相色譜法只能在同一張譜圖下檢測(cè)出某類或某幾類化學(xué)成分，難以實(shí)現(xiàn)多種物質(zhì)的同時(shí)檢測(cè)；(3)檢測(cè)依賴標(biāo)準(zhǔn)品做參比，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果。目前，參考文獻(xiàn)[1-2]中對(duì)配方乳粉中水溶性小分子檢測(cè)的報(bào)道主要有液相、氣相、質(zhì)譜等方法，但這些方法也都是針對(duì)一個(gè)或一類物質(zhì)的檢測(cè)，難以實(shí)現(xiàn)多種小分子水溶性物質(zhì)的全面檢測(cè)。但配方乳粉，尤其是嬰幼兒配方乳粉是一個(gè)復(fù)雜混合物體系，因受其原料乳來源、配方設(shè)計(jì)、生產(chǎn)工藝、添加成分及儲(chǔ)存條件不同影響，其含有的物質(zhì)成分存有差異，因此，對(duì)一個(gè)或幾個(gè)化學(xué)成分進(jìn)行檢測(cè)的方法難以適用于多配方、多成分的嬰幼兒配方乳粉質(zhì)量控制和安全評(píng)價(jià)，需要開發(fā)出一次性能夠?qū)Χ喾N成分進(jìn)行定性、定量的分析方法。

定量核磁共振(quantitative nuclear magneticresonance，qNMR)分析方法以結(jié)構(gòu)測(cè)定為基礎(chǔ)，具有前處理過程簡(jiǎn)單，取樣量小，專屬性強(qiáng)，無需對(duì)照品做參比即可同時(shí)定性、定量等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛的用于藥物分析等研究領(lǐng)域。核磁共振技術(shù)是無偏性的無損檢測(cè)，一次檢測(cè)能測(cè)定多種物質(zhì)成分，對(duì)食品生產(chǎn)中原料的質(zhì)量控制、產(chǎn)品穩(wěn)定性、生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的新物質(zhì)成分及產(chǎn)品研發(fā)過程中品質(zhì)的鑒別，具有很好的檢測(cè)優(yōu)勢(shì)。理論上，¹H-NMR的譜峰與樣品中各化合物的氫原子一一對(duì)應(yīng)，所測(cè)樣品中的每一個(gè)氫原子都在圖譜中有其相關(guān)譜峰，且信號(hào)的相對(duì)強(qiáng)弱反映樣品中各組分的相對(duì)含量因此檢測(cè)普適性高，非常適合多種成分的同時(shí)檢測(cè)。

傳統(tǒng)的qNMR法是在樣品中加入已知量的化合物作為校正參比內(nèi)標(biāo)，將被測(cè)樣品定量質(zhì)子的信號(hào)峰面積與內(nèi)標(biāo)物定量信號(hào)峰面積進(jìn)行比較，最終確定樣品的濃度。因此，qNMR法的準(zhǔn)確性依賴于完整清晰的定量信號(hào)峰和準(zhǔn)確的定量峰積分面積。然而，配方乳粉制品，尤其是嬰幼兒配方乳粉的成分復(fù)雜，小分子水溶性成分結(jié)構(gòu)相似、含量不高，導(dǎo)致¹H-NMR信號(hào)峰會(huì)出現(xiàn)信號(hào)峰重疊，因此會(huì)難以辨認(rèn)，并對(duì)隨后的積分計(jì)算的精確度產(chǎn)生影響。例如，采用傳統(tǒng)qNMR方法進(jìn)行定量分析時(shí)，會(huì)遇到無法得到完整信號(hào)積分，受相位、基線調(diào)節(jié)影響大等問題，從而影響定性、定量的準(zhǔn)確性。