[發明專利]一種六基因缺失的豬偽狂犬病毒、豬偽狂犬病疫苗以及制備方法

有效

• 申請號: 201811508839.0
• 申請日: 2018-12-10
• 公開（公告）號: CN109609468B
• 公開（公告）日: 2020-06-30
• 發明（設計）人: 周遠成;林艷;代洪波;王雪濤;廖果;鄺聲耀;陰文奇
• 申請（專利權）人: 畜科生物工程有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/245;A61K47/26;A61K47/18;A61K47/42;A61P31/22;C12R1/93
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙) 51229
• 代理人: 李蕊

本發明公開了一種六基因缺失的豬偽狂犬病毒、豬偽狂犬病疫苗以及制備方法，涉及動物生物制品領域。本發明提供六基因缺失的豬偽狂犬病毒的保藏編號為CGMCC No：16290。該六基因缺失的豬偽狂犬病毒缺失六個基因，致病性被去除，其免疫原性被有效保留，使用該豬偽狂犬病毒制備的疫苗，可誘導機體產生更高級劑量的干擾素，在緊急免疫接種方面具有更好的免疫效果。

技術領域

本發明涉及豬偽狂犬病疫苗領域，具體而言，涉及一種六基因缺失的豬偽狂犬病毒、豬偽狂犬病疫苗以及制備方法。

背景技術

豬偽狂犬病(Pseudorabies,PR)又稱奧耶斯基氏病(Aujeszky's disease,AD)，是由偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)所引起的豬、牛、羊等多種家畜和野生動物以發熱、奇癢(豬除外)及腦脊髓炎為主要癥狀的一種高度接觸性傳染病。豬是該病的天然宿主、主要儲存宿主和傳染源，無論是新生仔豬、育肥豬，還是成年種豬，都受到PR的威脅。其表現癥狀為：2周齡內仔豬感染后死亡率很高，可達100％，可出現腹瀉、嘔吐、共濟失調、角弓反張、四肢泳動等神經癥狀，最后麻痹、衰竭死亡；斷奶仔豬也能引起死亡，但主要表現為呼吸系統癥狀，也有部分豬出現神經癥狀、腹瀉、嘔吐等，耐過的仔豬往往發育不良，成為僵豬；育肥豬感染后則大多數伴有體溫升高，呼吸困難，偶有神經癥狀，一般不發生死亡；成年豬感染后不發病或僅表現為體溫升高等輕微癥狀，呈隱形感染，耐過后主要表現生長發育遲緩，飼料報酬降低等，并可長期帶毒或排毒，成為最危險的傳染源；妊娠母豬感染后會導致流產、產死胎、木乃伊胎等；該病還可引起種豬不育、公豬睪丸腫脹、母豬返情、屢配不孕等。

偽狂犬病毒只有一個血清型，但不同毒株在毒力和生物學特征等方面存在差異。疫苗接種是有效防制豬偽狂犬病最經濟、有效的方法。但現有的豬偽狂犬病疫苗的免疫效果并不理想。

鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種六基因缺失的豬偽狂犬病毒，該豬偽狂犬病毒是經人工改造后得到的，其缺失六個基因，致病性被去除，其免疫原性被有效保留，使用該豬偽狂犬病毒制備的疫苗，可誘導機體產生更高級劑量的干擾素，在緊急免疫接種方面具有更好的免疫效果。

本發明的另一目的在于提供上述豬偽狂犬病毒的應用。

本發明的另一目的在于提供一種豬偽狂犬病疫苗，該疫苗由上述六基因缺失的豬偽狂犬病毒制成，其具有較好的免疫效果。

本發明的另一目的在于提供一種制備上述豬偽狂犬病疫苗的方法。通過該方法制得的豬偽狂犬病疫苗，具有較好的免疫效果。

本發明是這樣實現的：

2011年前后在全國范圍了出現了新的豬偽狂犬病疫情，主要表現為突發性大面積種豬流產，育肥豬致死性感染，豬群gE抗體陽性率突然升高，部分豬場gE抗體陽性率高達100％。疫情爆發的不同地區，免疫狀況不同而呈現出不同的臨床表現。免疫狀況較好的豬場，大多無明顯臨床癥狀，但豬群gE陽性率突然升高；免疫狀況較差的豬場，主要表現為種豬的大面積流產、仔豬腹瀉、育肥豬呼吸道癥狀與急性死亡。新疫情爆發以后全國多個實驗室分離到新的豬偽狂犬病毒流行毒株，經過致病力實驗、免疫保護實驗和分子流行病學等研究，一致認為新流行的豬偽狂犬毒株在主要毒力基因gE、gI基因，以及與免疫保護相關的基因gB、gC、gD上存在多個位點的變異。我國不同地區分離的新流行毒株，與目前廣泛使用的豬偽狂犬病活疫苗Bartha K61毒株位于不同的基因亞型，動物試驗與中和抗體檢測均證實，Bartha K61毒株對我國當前流行的豬偽狂犬病毒保護效果較弱，本發明使用新分離的變異毒株構建了TK、gE、gI、11K、28K和gG等6個基因缺失的偽狂犬病活疫苗，與市場上使用的TK/gE/gI、gE/gI基因確實疫苗相比較，該疫苗能夠誘導機體產生更高級劑量的干擾素，在緊急免疫接種方面具有更好的效果。使用流行毒株構建的基因缺失疫苗能夠為仔豬提供100％免疫保護。