[發明專利]一種泰山四葉參微種根的培養方法

在審

• 申請號: 201811448429.1
• 申請日: 2018-11-30
• 公開（公告）號: CN109258474A
• 公開（公告）日: 2019-01-25
• 發明（設計）人: 黃艷艷;郭偉;李國華;王玉山;趙進紅;王新花;季霞;李冬梅
• 申請（專利權）人: 泰安市泰山林業科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G22/25
• 代理公司: 濟南誠智商標專利事務所有限公司 37105
• 代理人: 劉莎莎

1.一種泰山四葉參微種根的培養方法，其特征在于，具體步驟如下：

（1）材料選取 從泰山四葉參組培苗中選擇生長健壯、至少具1個節、莖稈粗壯，莖段基部直徑0.2 cm以上，高度1 cm以上，且具完整葉片的單株無菌瓶苗為試驗材料；

（2）無菌微根莖的誘導 將第一步中選取的材料泰山四葉參無菌瓶苗，基部向下，扦插在無菌微根誘導培養基上，進行不定根誘導，密度瓶內株距0.5-1 cm，每株高度1-1.5 cm；在無菌微根誘導培養基上培養長到7-15 cm后，莖段基部長出白色不定根，數量1-10條，根粗0.1 cm左右；

（3）微根莖增殖

將已生出不定根的泰山四葉參無菌苗，在同一種培養基繼續培養50-80 d后，白色不定根明顯膨大變粗，長成直徑0.3-0.8 cm左右，類似大田根莖的紡錘形、圓形或橢圓形無菌微根莖，且表面著生1-7條須根，須根根粗0.1-0.3 cm，白色，長度1-5 cm，此時，莖稈仍保持粗壯生長狀態，高度4-6 cm，可繼續用于下一輪微根莖培養，按剪取標準剪取培養基表面以上壯苗重復步驟1和2的培養過程，剪取后剩余部分繼續在原培養基培養；

（4）微根莖的預處理

當紡錘形微根莖粗達0.3-0.5 cm，圓形或橢圓形微根莖直徑達0.5-1.0 cm時即可用于移栽，移栽前，先進行預處理，按剪取標準修剪掉著生微根莖原株大部分莖葉，修剪掉的莖葉材料，可根據具體部位及需要分別用于再生擴繁或重復步驟1操作程序；

（5）微根莖移栽

修剪后剩余原株直接用于移栽，或繼續存放在原培養基內等待移栽，移栽前先洗凈附著在微根莖上的培養基，直接移栽于育苗盆或大田均可；

育苗盆移栽方式：將頂芽向上放在盆內，并覆土，覆土深度2-5 cm；移栽后，及時噴水，使覆土緊實；移栽后保持濕潤，放在自然光照且溫度不低于0-5℃的室內，此方式可全年進行；

大田移栽方式：開溝移栽，溝寬5-10 cm，深5 cm；株距10-15 cm，微根莖頭部向上，斜放在溝內，并覆土，覆土深度2-5 cm，微根莖移栽后，及時噴水，使覆土緊實，大田移栽時間：4-7月；

（6）大田微根培養

微根莖移栽后保持土壤濕潤，7-15 d后，開始發新芽，小苗發芽后繼續培養20-30 d，可抽生5-10 cm新莖稈，此時表明，移栽的無菌微根莖已完全成活，并可正常生長；同時也表明，地下根莖長成的組培苗也已完全成活并正常生長，此時，這類型成活組培苗可同常規大田苗采取同樣管理措施；

至10月底，成活大田苗地下根莖粗度可達0.5-1.0 cm，形狀與大田根莖類似，只是形體大小明顯小于常規大田根莖，此類型地下根莖即為大田微種根，此類型根莖可直接在大田自然越冬，并可于翌年春正常萌發新芽生長，自然越冬后所獲大田微種根可同常規根莖一樣作為種根進行異地運輸和移栽。

2.根據權利要求1所述的一種泰山四葉參微種根的培養方法，其特征在于，無菌微根誘導培養基分為：無激素誘導培養基：為MS培養基，將接種在此培養基上的莖段培養10-15 d后，莖段基部長出白色不定根，數量3-8條，莖基根粗直徑0.1 cm左右；

有激素誘導培養基：在MS培養基上加入生長調節劑IBA0.1-0.5 mg/L，接種在此培養基上的莖段培養7-15 d后，莖段基部長出不定根，數量1-10條，白色，長度0.5-3 cm，莖基根粗直徑0.1 cm左右。

3.根據權利要求1所述的一種泰山四葉參微種根的培養方法，其特征在于，所述微根莖整個培育期的培養條件均為：光照培養12h/d，光照強度12000 lx，溫度25℃左右。

4.根據權利要求1所述的一種泰山四葉參微種根的培養方法，其特征在于，所述步驟（3）和（4）的剪取標準為：培養基表面莖段自下而上1-1.5 cm、至少保留1對節間在原株即可。