[發明專利]一種豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗及其制備方法

有效

• 申請號: 201811420793.7
• 申請日: 2018-11-27
• 公開（公告）號: CN109602902B
• 公開（公告）日: 2022-10-28
• 發明（設計）人: 張毓金;嚴悌昆;謝秉超;楊球;曾憲淇
• 申請（專利權）人: 廣東漁躍生物技術有限公司
• 主分類號: A61K39/385
• 分類號: A61K39/385;A61K39/102;A61P31/04
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 徐翔

本發明屬于獸用疫苗技術領域，具體涉及一種豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗及其制備方法。所述豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗包括豬多殺性巴氏桿菌莢膜多糖和蛋白類載體，兩者經納米微球連接而成，其中豬巴氏桿菌莢膜多糖、蛋白類載體和納米微球的重量比為(1.5～2.5)：(0.5～1)：1。所述豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗的制備方法包括以下步驟：多糖?納米微球偶聯體的制備、多糖?納米微球偶聯體的改性以及豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗的制備。本發明豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗采用莢膜多糖和破傷風類毒素相結合，提高了疫苗的免疫原性，制備的疫苗免疫原性強、安全無毒副作用并且接種效果好。

技術領域

本發明屬于獸用疫苗技術領域，具體涉及一種豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗及其制備方法。

背景技術

多殺性巴氏桿菌是一種革蘭氏陰性短桿菌，能夠感染家畜、家禽和野禽等多種動物，具體表現為禽類的禽霍亂、豬肺疫、牛和兔等動物的出血性敗血癥。其中，豬是巴氏桿菌最常見的自然宿主，其會引起豬體的肺炎、敗血癥甚至混合感染，導致豬群的高發病率和高死亡率。我國傳統上所說的“豬肺疫”是由豬多殺性巴氏桿菌引起的一種急性傳染病，俗稱“鎖喉風”，其中急性癥狀表現為敗血癥變化、咽喉部腫脹和高度呼吸困難，慢性癥狀表現為慢性肺炎。傳統的對于豬多殺性巴氏桿菌感染的治療主要采用藥物治療如抗生素等，但近年來隨著抗生素的廣泛使用，多殺性巴氏桿菌的耐藥性越來越強，而且還會產生一定的副作用，因此多殺性巴氏桿菌引起的疾病單純的靠藥物預防已經變得越來越困難。

中國專利文獻CN 107569681 A公開了一種牛多殺性巴氏桿菌病二價滅活疫苗及其制備方法，該疫苗由抗原和疫苗佐劑組成，其中的抗原為牛多殺性巴氏桿菌莢膜A型Pm-TJ株和牛多殺性巴氏桿菌莢膜B型C45-2株，該種滅活疫苗雖然安全可靠，但在使用上具有一定的局限性，能否應用于其他畜類尚未可知。目前，除了藥物治療外，主要采用滅活疫苗和活菌疫苗來預防豬多殺性巴氏桿菌病，但滅活疫苗只對同源菌株的感染具有保護作用，而活菌疫苗對同源菌株和異源菌株的感染具有一定的交叉保護作用，但易出現毒力返強的現象。

莢膜是存在于多殺性巴氏桿菌細胞壁外的一層粘液性物質，可保護細菌免受抑菌或殺菌物質的侵害以及宿主吞噬細胞的吞噬，同時還有助于細菌黏附于宿主細胞表面以誘發感染，是細菌得以生存的重要表面結構。研究表明，多殺性巴氏桿菌的莢膜主要成分是多糖，是細菌重要的保護性抗原和毒力因子，同時也是細菌結構變化最少的表面抗原，具有較好的免疫原性，因此是最適宜做疫苗的靶抗原之一。莢膜多糖疫苗與傳統疫苗相比，其成分單一，不存在易引起免疫副反應的物質，使得該類疫苗更為安全、有效，已成為應用最多的疫苗之一。

近年來，已經出現了將莢膜多糖應用于制備多殺性巴氏桿菌疫苗的實例。例如，中國專利文獻CN 104163858 A公開了一種多殺性巴氏桿菌無細胞抗原，所述抗原來自滅活的多殺性巴氏桿菌培養物的上清液，所述的上清液含有多糖和蛋白，該疫苗具有注射部位局部副反應小及對動物的生長影響作用小，但是其由于分子量過小導致免疫原性效果不佳。中國專利文獻CN 106729696 A公開了一種羅非魚源無乳鏈球菌莢膜多糖疫苗的制備方法及其應用，該疫苗由魚源無乳鏈球菌莢膜多糖制備所得，并與破傷風類毒素載體相結合，獲得的疫苗特異性強并具有免疫保護力。

基于目前的多殺性巴氏桿菌疫苗存在著免疫原性低、使用上存在著局限性、需要進行多次接種以及可能有一些殘留的毒力等問題，因此急需為人們提供一種新型的免疫原性強、安全無副作用并且接種效果好的豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗及其制備方法。

發明內容

本發明旨在克服現有技術的不足，提供一種豬巴氏桿菌多糖蛋白偶聯疫苗及其制備方法，該多糖蛋白偶聯疫苗采用莢膜多糖和破傷風類毒素蛋白載體相結合，提高了疫苗的免疫原性，制備的疫苗免疫原性強、安全無毒副作用并且接種效果好。

為了實現上述目的，本發明的技術方案如下：