[發明專利]一種鐵皮石斛葡甘聚糖

有效

• 申請號: 201811388543.X
• 申請日: 2018-11-21
• 公開（公告）號: CN109651532B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 劉京晶;斯金平;吳世華;梁君玲;俞巧仙;史小娟
• 申請（專利權）人: 浙江農林大學;浙江森宇有限公司
• 主分類號: C08B37/14
• 分類號: C08B37/14;A61K31/736;A61P35/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高

本發明公開了一種鐵皮石斛葡甘聚糖，其特征在于所述鐵皮石斛葡甘聚糖的重均相對平均分子量為398.4 kDa；所述鐵皮石斛葡甘聚糖中甘露糖與葡萄糖的摩爾比為5.32：1，糖鏈連接方式為1,4?Man(p)：1,4?Glc(p)：t?Man(p)：t?Glc(p)摩爾比為3.77：1.00：0.08：0.03。其提取方法包括：鐵皮石斛粗多糖提取——、鐵皮石斛精多糖分離——純化鐵皮石斛純多糖純化過程。本發明所提供的新的鐵皮石斛葡甘聚糖具有很好的抗黑色素瘤細胞活性，在制備抗腫瘤藥物方面具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于制藥領域。更具體地，涉及一種鐵皮石斛葡甘聚糖及其制備方法和應用。

背景技術

多糖具有復雜多樣的結構和生物活性，特別是在增強機體免疫力和抗腫瘤方面有良好的作用。惡性黑色素瘤是一種高度惡性腫瘤，多發生于皮膚，發病率在過去幾十年中正逐步提高，成為皮膚的首位致死性疾病。主要由日光暴曬、遺傳、性別、激素和黑色素細胞痣等原因引起。

鐵皮石斛Dendrobium catenatum Lindley(D.officinale Kimura et Migo)為蘭科石斛屬名貴藥用植物，莖入藥，始載于《神農本草經》，列為上品；具有益胃生津，滋陰清熱的功效；2010年版《中國藥典》特將鐵皮石斛從藥材石斛中劃出，單獨收載。野生鐵皮石斛瀕臨滅絕，被列入《中國植物紅皮書》，20世紀90年代以前完全依靠野生資源，沒有形成產業，成為稀缺藥材。隨著種子生產、組培育苗和設施栽培等人工栽培關鍵技術的突破，鐵皮石斛全國栽培面積超10萬畝，產值達200億元，成為我國市場份額最大、發展最快的中藥材之一。

鐵皮石斛多糖是一類混合物，是鐵皮石斛中所含的高分子碳水化合物的總稱，在鐵皮石斛中含量豐富，約占莖的干重的25～60％。具有免疫調節、抗氧化、抗心肌細胞損傷等活性。多糖的藥理活性與其相對分子質量、單糖組成、糖苷鍵類型等密切相關，牛樟芝多糖需要相對分子質量大于100kDa才具有明顯抗血管生成作用，手掌參多糖的免疫活性明顯受其α-1,4-半乳糖醛酸和β-1,4-甘露糖苷鍵影響。近年來，石斛屬植物多糖的研究取得了很大的進展，但與蛋白質、核酸和小分子化合物的研究相比還有很大距離，并且不夠深入，主要有以下方面的問題：(1)多糖的構效關系闡釋不清晰，通常認為多糖的活性與糖鏈組成和連接方式等一級結構、分子量、溶解度和高級結構等相關，但缺乏系統性研究和充分的科學依據，大多尚屬推測和分析；(2)多糖體內代謝機理研究不夠深入，其活性靶點和作用機制的研究甚少；(3)多糖與腸道菌群微環境和生物功能之間的關系還不十分清楚，有待深入研究。

雖然存在諸多困難，但多糖因其低毒性具有巨大的發展潛力。鐵皮石斛中均一多糖用于抗黑色素瘤的研究尚未見報道。研究鐵皮石斛葡甘聚糖在抗腫瘤尤其是抗黑色素瘤方面的應用，可進一步開拓在抗黑色素瘤方面的藥物來源。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有鐵皮石斛多糖及其結構研究的技術不足，提供一種新的鐵皮石斛多糖，以及這種鐵皮石斛葡甘聚糖的制備方法。

本發明的另一目的是提供鐵皮石斛葡甘聚糖在抗黑色素瘤方面的應用。

本發明上述目的通過以下技術方案實現：一種鐵皮石斛葡甘聚糖，其特征在于，所述鐵皮石斛葡甘聚糖的重均相對平均分子量為398.4kDa；所述鐵皮石斛葡甘聚糖中甘露糖與葡萄糖的摩爾比為5.32：1，糖鏈連接方式為1,4-Man(p)：1,4-Glc(p)：t-Man(p)：t-Glc(p)摩爾比為3.77：1.00：0.08：0.03。

本發明所述的鐵皮石斛葡甘聚糖由如下方法制備得到：

S1.提取鐵皮石斛粗多糖：

S11.取鐵皮石斛莖段，加入溫水進行攪碎榨汁，控制溫度在50～70℃，料液比為1:3～1:5；

S12.將S11得到的溶液離心，上清液濃縮后加入無水乙醇，4℃放置過夜；